山东腹水外泌体western blot

时间:2021年02月16日 来源:

有研究表明外泌体通过唤醒瘤相关信号通路、诱导免疫耐受、重塑细胞外基质、增强瘤细胞侵袭性和调控瘤微环境促进瘤的发生和发展,外泌体在瘤的诊断上有诸多优势:外泌体可保护其中的核酸类物质,防止其迅速降解;外泌体的形成与亲源细胞的状态密切相关;针对外泌体内容物的检测比传统的瘤标志物更具有特异性;外泌体宽泛存在于多种体液样本中,以其为基础的瘤诊断可在病情发展过程中及时监测分子标志物的变化,这种检测更易监控且样本更易收集。免疫印迹法(WB)和Elisa检测法作为被普遍应用的外泌体检测的一般方法。山东腹水外泌体western blot

胃病作为一种常见的恶性瘤,在亚洲具有较高的发病率.胃病的临床诊断方法与结肠病相同,主要依靠内窥镜,早期胃病的症状并不明显,且临床常用的瘤标志物对胃病患者特异性与敏感性均较差,因此,胃病往往发现于晚期,并伴有不同程度的转移。研究者发现胃病细胞高表达CD97并可经外泌体分泌的方式调节瘤细胞的MAPK信号通路,促进瘤细胞的增殖与侵袭。外泌体中CD97的检测成或许能成为一种有潜在价值的胃病诊疗工具。胃病细胞能选择性地将let-7包装到外泌体中,并释放至周围环境中,促进胃病的恶性进展。胃病细胞外泌体可作用于抗瘤的T细胞,抑制AKT的活性。外泌体与免疫细胞之间的相互作用揭示了瘤抑制免疫功能的潜在机制。在另一项被认为有潜在胃病诊断价值的lnRNA的研究中,通过对胃病患者、胃上皮异型增生与健康人的比较发现,LINC00152在胃病患者的血液中可被检测到高表达,且手术前后有明显变化。血清LINC00152主要存在于外泌体中,在外泌体的保护下,可以稳定保存,血清外泌体LINC00152具有胃病标志物的潜能。黑龙江细胞上清外泌体提取细胞分泌到细胞外环境中分别称为外泌体和微泡的细胞外膜泡。

全自动外泌体荧光检测分析系统的基本原理是一种基于特异性免疫捕获技术,允许研究者直接分析特定群体的外泌体或外囊泡。通过配套的试剂盒,客户一次性能够分析多达9个不同的样本,很大节省了时间和经济成本。全自动外泌体荧光检测分析系统兼容各种生物样本,除了纯化的外泌体之外,对于血液、尿液、腹水中的外泌体也可直接检测分析,很大拓展了研究范围。全自动的可对单个外泌体进行表征分析的全新设备。该设备能够提供全部的外泌体表征信息,包括外泌体粒径大小、计数、分布、携带蛋白表达、生物标志物(CD9,CD81,CD63等)共定位等。操作简单,结果可靠。一经推出,便引起了外泌体领域科研工作者的普遍关注,短短两年时间在全球已有50多个实验室采用该技术,发表重要文献近百篇。

外泌体中这些物质的结构与它们在分泌细胞内的结构不同,所以可能存在一种外泌体特异蛋白和mRNA/miRNA在外泌体内选择性积累的机制。这种特异性可将外泌体内的RNA作为生物标记,更进一步作为医治开发方法的靶点。外泌体中的mRNA一旦被靶细胞吞噬,能够引起这个细胞内的功能性蛋白的表达,但外泌体中多数的miRNA是前体而非功能性miRNA,这些miRNA起着何种生理性意义,学者们正在研究。由于外泌体含有各种蛋白质、RNA和脂质,研究人员正将其进行细胞分类,建立数据库(ExoCarta)。此外,在世界各地分别进行着运用蛋白质组学、转录组学和系统生物学的大规模分析工作,而FunRich的EV plugin作为一种通用的分析手段已被公布出来。今后,在推进外泌体研究方面,各领域的研究人员信息共享至关重要。外泌体是细胞分泌囊泡的一种亚型,存在于生物体液中,并参与多种生理和病理过程。

l 亲脂染料标记外泌体:目前已发表的外泌体文章中,外泌体大多使用亲脂性染料进行标记,体内和体外都有较多应用。亲脂性染料主要分为两大类,一类是PKH67(绿色荧光)/PKH26(红色荧光),由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合,所以染色效果较好,应用较普遍。第二类是Di系列的亲脂性染料,包括DiI(橙色荧光)、DiO(绿色荧光)、DiD(红色荧光)、DiR(深红色荧光)。其中DiR的红外荧光可穿透细胞和组织,在活成像中用来示踪。日本和光着眼于巨噬细胞的外泌体受体Tim4蛋白,制备Tim4细胞外域与磁珠结合的“Tim4磁珠”。北京外泌体荧光标记

干细胞外泌体可用于中风的治理,改善神经预后,增加血管与神经生成。山东腹水外泌体western blot

外泌体的形成始于细胞内陷,成熟于多囊泡胞内体,终于膜融合。细胞通过内吞作用产生小囊泡,小囊泡融合形成早期胞内体(earlyendosome),在多个蛋白的协同调控下,早期胞内体出芽形成含有多个腔内小囊泡的多泡体(multivesicularbodies,MVB),这个过程中这些腔内小囊泡(intraluminalvesicles,ILVs)会装载各种核酸和蛋白质等分子,泡内体较后在GTPase家族中RAB酶的调节下与细胞膜融合。随后,这些小囊泡会被释放到细胞外,称为外泌体。外泌体是通过细胞内吞细胞膜融合主动排除的物质,大小均匀,而微泡是由细胞直接出芽脱落生成,大小不均一。山东腹水外泌体western blot

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