上海组织外泌体

外泌体的生物发生途径主要包括三个关键的检查点：ILV的形成，阻止MVEs的降解以及MVEs和细胞膜的融合，这三个检查点都包含在内体相关的囊泡运输过程中。RABGTPase定位到特定膜结构的表面，通过招募效应因子来调节相应膜结构的囊泡运输，例如，在内体溶酶体运输网络中，RAB5调节早期内体的形成及相互融合；内体膜上RAB5到RAB7的转换调节早期向晚期内体的转变；RAB7调节晚期内体/MVEs与溶酶体的融合来降解ILVs；RAB27调节MVEs与细胞膜的对接和融合来释放ILVs形成外泌体。内吞的膜蛋白，特别是受体酪氨酸激酶家族的表皮生长因子受体，定位到内体和MVEs，通过MVEs和溶酶体融合来进入溶酶体降解，此过程受多种RABGTPases和ESCRT复合体的调控。外泌体作为核酸分子的药物载体主要用于基因治理。上海组织外泌体

外泌体的组成较为复杂，其内含有多种生物大分子，如：核酸（双链DNA和各种RNA亚型）、蛋白质和脂质。这些分子被外泌体携带进入血液循环，而后被靶细胞吸收，从而调节靶细胞基因表达和细胞功能。此外，外泌体相关的miRNA作为短单链和非编码RNA分子，调节致病基因或抑病基因的表达，参与细胞分化、细胞凋亡及细胞信号的传导。有研究表明，外泌体能影响种瘤微环境的形成、增强种瘤细胞的侵袭和转移能力、介导种瘤免疫压制及参与种瘤放化疗抵抗进而促进种瘤的发发展。江苏血清外泌体染色高浓度集聚诱导细胞死亡的TNF-α，可使类风湿关节炎恶化。

脑组织分离方法简述：将脑组织剪成薄片，放入离心管中加上消化液进行消化，经水浴、反复轻轻上下颠倒，再用移液间断缓慢吹吸至消化结束。随后加入培养基于消化液中，混匀，置于冰上。再进行一系列的差速超速离心过程，包括除杂、滤膜过滤、超离等。后用PBS重悬外泌体，用重悬后的外泌体进行下面的透射电镜（TEM）、纳米粒径追随分子（NTA）和marker WB鉴定。所有的细胞都能分泌外泌体，但是不同细胞分泌的外泌体不管在数量上还是在内含物中都具有很大的差异性，这也决定了每种外泌体所行使的功能不一样。

在种瘤微环境中，种瘤细胞来源的外泌体能够诱导CD4+T分化为调节性T细胞，压制机体的抗种瘤免疫反应；肺病细胞分泌的外泌体含有miR-21和miR-29a，可在免疫细胞中结合并开启TLR8，使TLR介导的NF-κB信号通路活化，从而导致种瘤的生长和转移。在肺病的侵袭和转移过程中，细胞间通讯扮演着重要的角色。据有关报道称，NSCLC分泌的外泌体内TGFβ和IL10的高表达与肺病的转移密切相关。此外，开启的T细胞可以通过调控Fas信号通路增加基质金属蛋白酶9（MMP9）的表达，进而促进肺病的转移。这些机制有望成为肺病医治的潜在靶点。虽然大多数外泌体都是促进种瘤的侵袭与转移，但也有报道称，外泌体miR-302b可以通过压制TGFβRⅡ来压制肺病细胞的转移与增殖。随着EV研究倍受世界瞩目，各国启动了大型研究项目。

外泌体是由各种细胞分泌的小型膜囊泡（直径30~100nm），存在于大多数体液（如血液、尿液、髓液等）和细胞培养液中。外泌体是由脂质双层膜包被的膜囊泡，产生于称为多囊泡体的细胞外囊泡中，多囊泡体通过与细胞膜融合将外泌体释放到细胞外。外泌体含核内体来源的蛋白质（如ESCRTs）、细胞内运输相关蛋白（如RabGTPase等）及细胞膜来源蛋白（如CD63, CD81等）等各种内分泌细胞来源的蛋白和RNA，同时还含有分泌细胞膜来源和内体膜来源的脂质（如胆固醇和鞘磷脂等）。必须慎重分析得到的是否是外泌体。江西外泌体Dil

外泌体是一种由活细胞分泌的，直径约为40～160nm的具有双层膜结构的生物活性囊泡。上海组织外泌体

外泌体（Exosome），是细胞外囊泡（EV）的一种主要类型，是直径为30至150nm的纳米大小的膜结构，大多数细胞都会分泌外泌体。外泌体存在于各种生物体液中，通过其携带的蛋白质、核酸、脂质和代谢物等来发挥细胞间通讯功能，参与免疫应答、代谢和心血管疾病、神经退行性疾病以及病症进展等多种生理和病理过程。在内体转变为成熟多囊泡内体（MVE）的过程中，内体膜向腔内出芽形成腔内囊泡（ILV），MVE与细胞膜融合释放ILV到细胞外，即形成外泌体。上海组织外泌体