成都外泌体质谱

外泌体是包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡 (30–150nm)，由所有体外和体内细胞持续分泌。由于人体内复杂的功能，包括细胞间通讯和信号转导，外泌体正在改变研究。这些细胞外囊泡正在生长，这既是为了了解其生物学功能，也是为了将其用于实际应用，如无创诊断和高级医治开发。提供一系列外泌体分离产品和工具，用于表征和分析其RNA和蛋白质含量，以及体外和体内追踪，以帮助您进一步了解这些迷人的外泌体。超速离心方案可能冗长乏味且耗时的。您可使用灵活且可扩展的总外泌体分离试剂从细胞培养基或任何体液中即刻分离完整的外泌体。这些试剂及其随附的方案是多种试验的理想选择，包括处理少量样本和处理多个样本。外泌体特指直径在40-100nm的盘状囊泡。成都外泌体质谱

近年来众多文献报道，肺病细胞分泌的外泌体中富含多种蛋白质并促进肺病的发发展，是早期诊断肺病的有效途径。有研究发现，NSCLC患者肺组织外泌体表面EGFR免疫染色呈阳性的占80%，而慢性肺炎组织的外泌体EGFR呈阳性的只占2%，因而认为外泌体的EGFR蛋白可以用作NSCLC与慢性肺炎鉴别诊断的生物标志物。Park等通过Sys-BodyFlu-id数据库分析发现153种特异性胸腔积液外泌体蛋白质，进一步的Western blotting分析显示多种特异性胸腔积液外泌体蛋白参与EGFR信号传导途径以促进种瘤的发发展，因此外泌体蛋白可能作为肺病诊断筛查的生物学标记物。成都外泌体质谱科学家也尝试利用外泌体的压制发病机制功能。

外泌体免疫磁珠法，这种方法可以保证外泌体形态 的完整，特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备，但是非中性pH 和非 生理性盐浓度会影响外泌体生物活性， 不便进行下一步的实验 。PS亲和法，该方法将PS（磷脂酰丝氨酸）与磁珠结合，利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似，获得的外泌体形态完整，纯度高。由于不使用变性剂，不影响外泌体的生物活性，外泌体可用于细胞共培养和体内注射。2016.9 《Scientific Reports》 杂志发表了该方法新数据，表明PS法可提取相当高纯度的外泌体。色谱法，这种方法分离到的外泌体在 电镜下大小均 一， 但是需要特殊的设备 ， 应用不普遍 。

随着外泌体的功能逐渐被发现，近年来，应用这些功能的医治法也在被开发出来。例如，血液中的成纤维细胞所释放的外泌体，可以促进角质形成细胞的移动和增殖以及血管新生来促进伤口愈合。有报导指出，外泌体内miRNA参与促进血管新生、抗症性和促进胶原蛋白沉淀等一系列过程。从症状患者树突状细胞释放的外泌体中，含有各种症状细胞来源的蛋白质，可以强化杀伤性T细胞对症状细胞的特异性反应。利用此功能的抗种瘤免疫疗法，目前正处于初期临床研究阶段。各种细胞粘着分子在外泌体膜表面表达，由其决定外泌体被运输往哪一种细胞。

样本预处理与外泌体分离、保存：外泌体存在于人类或动物的各种体液中，我们可以选择不同的样本来源进行相关的外泌体研究。由于外泌体是来源于细胞质膜内陷的含有脂质双分子层膜结构的多泡小体，分布于胞外基质。为了获得高纯度的外泌体，必须确保有效去除所有的细胞碎片及其他不需要的杂质。不同的实验样本采集时需要注意的地方不一样，如细胞培养上清在收集样本前需换成无外泌体血清培养、血浆样本采集时用一定不能用肝素抗凝管、尿液收集时需要加抑菌剂等。1983年，外泌体初次于绵羊网织红细胞中被发现。成都外泌体质谱

有望在外泌体和微囊泡生理功能的分析研究上起重大贡献。成都外泌体质谱

作用机制主要是旁分泌的间充质干细胞（MSC）被普遍地用于医治各种人类疾病。已经证明没有一个因素足以调解MSC的医治效果。然而，由许多细胞（包括MSC）分泌的外泌体膜囊泡是有吸引力的候选物作为其功效的载体。外泌体可以运输和运送大量的蛋白质、脂质和核酸，并可以改变细胞和身体部位的功能。除了作为细胞间通讯的关键作用之外，外泌体越来越多地被认为是疾病的生物标志物和预后因子。此外，它们有潜力被用作临床应用基因和药物递送的载体。该文回顾了外泌体的生物发生、分子组成及其作为细胞间通讯的信使的作用，着重于其作为干细胞医治的载体的潜力。成都外泌体质谱