安徽外泌体载药实验

外泌体载药系统的优势：1首先，外泌体天然的生物学起源为细胞内源性zhiliao因子的产生和装载提供了特有的机会。此时，zhiliao药物、寡核苷酸和纳米粒子等可被送入细胞，随后重新包装成分泌的囊泡。利用细胞产生、装载和分泌释放载药外泌体使zhiliao药物装载过程得到简化，为特定位点（如内腔和囊泡膜）的药物装载提供了基础，并且还使不易装载的物质句有更高的吸收效率和传递效率。2其次，外泌体可穿透某些生物屏障如血脑屏障，到达zhiliao靶点进行给药。3体内某些外泌体句有很强的稳定性，可避免被巨噬细胞吞噬和溶酶体所降解，为体内外泌体载药系统的长时间循环和长时间暴露于炎症等刺激环境时提供保护。装载miＲ-17-92团簇的间充质干细胞外泌体处理中风大鼠，其神经学功能得到改善。安徽外泌体载药实验

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——梯度密度离心法。外泌体的密度在1.1~1.19kg·L-1之间,因此,可以采用密度梯度离心法来分离外泌体。该方法是将超速离心结合蔗糖密度梯度或蔗糖垫结合,原理是先除去非囊泡物质,再通过梯度密度浓缩提取外泌体,该方法可以得到相对较为纯净的外泌体。传统的梯度密度方法通常需要离心16h,但是2012年,研究者使用了62~90h才分离出某些确切囊泡,因此,该方法可能不足以沉淀所有的外泌体。如果离心时间不充足,污染物质可能和外泌体保持在相同的密度层,特别是这个密度范围又比较宽。安徽外泌体载药实验外泌体载yao方法-共孵育方法适用于亲脂类药物。

采用外泌体作为药物载体，制备一种装载连翘酯苷A(FTA)的外泌体递药系统。细胞摄取实验的结果表明，A549细胞可以摄取FTA-Exos，并且能维持长时间的稳定，延长了半衰期，明显的提高了连翘酯苷A的生物利用度，为研究连翘酯苷A体外抗中流转移作用打下基础。经典划痕实验结果表明，FTA-Exos组对于A549细胞的迁移抑制率高达90%以上，明显高于连翘酯苷A组迁移抑制率，证实含药外泌体具有更好的体外抑制A549细胞迁移效果。成功建立了FTA-Exos药物递送系统，制备的FTA-Exos性质稳定优越，明显提高连翘酯苷A的生物利用度，并具有更好的抑制A549细胞迁移作用。

为考察装载药物的外泌体DATS-Exo在体内抑制中流转移的情况,将肺转移小鼠黑色素瘤中流细胞通过尾静脉注射入C57BL/6小鼠体内,建立实验性肺转移小鼠模型并通过腹腔注射给予DATS-Exo及DATS。结果显示,造模后,H&E染色发现模型组小鼠与正常组相比,肺部发生了严重的转移,体现在模型组小鼠肺部出现了较多的中流结节数目和较大的中流体积。不论是DATS组还是含药外泌体DATS-Exo组均表现出一定的抑制中流转移的效果,而与DATS组相比,装载了DATS药物的外泌体载药系统能更好地抑制中流的肺转移,减少中流结节数目,降低异常的肺重量,具有更优的抗中流转移作用。将药物载入外泌体的方法主要有两种：前转载和后转载。

传统的药物递送系统（如脂质体、合成纳米粒）jin能起到简单的药物递送作用，而外泌体不jin可以传递药物到受体细胞，并且它自身携带的mRNA、蛋白类等物质具有生理活性，因此在未来的研究中可以选择不同细胞来源的外泌体作为药物载体，对疾病进行更有效的zhiliao。除了通过细胞产生需要的不同类型外泌体，近年来对于仿生外泌体的研究也引起了人们广fan的兴趣。设计了一种通过离心悬浮细胞制备类似外泌体纳米囊泡的装置，这种装置制备的纳米囊泡产量比外泌体高250倍。因此，依靠仿生外泌体代替外泌体可以有效地解决外泌体载药量低、分离纯化耗时耗力、产量不足等问题，但它仍处于初步研究阶段。负载姜黄素的外泌体能促进抗精神类药物作用下的细胞胆固醇外流, 减少因药物不良反应造成的细胞内脂质沉积。安徽外泌体载药实验

外泌体装载小分子药物的方法有很多,主要有被动孵育、超声、电穿孔及供体细胞载药等。安徽外泌体载药实验

有研究发现，在外泌体载药系统中，对外泌体的产生环境进行干扰(如，缺氧)能够改变外泌体的分泌组分。Zhu等人研究了缺氧处理的间充质干细胞（MSCs）来源外泌体(ExoH)在心肌修复方面是否优于其在常氧条件下产生的外泌体(ExoN)。在小鼠心肌梗死实验中，ExoH处理的小鼠具有更高的生存率、更小的疤和更好的心脏功能恢复。进一步研究发现，相比于ExoN，ExoH具有更高表达水平的miＲ-210以及对外泌体分泌至关重要的中性鞘磷脂酶2(nSMase2)的表达。类似地，Zhu等人发现缺氧条件下MSC-Exo递送的miＲ125b-5p能够通过改善心肌细胞凋亡来促进缺血性心脏修复。此外，他们还将ExoH与缺血心肌靶向肽缀合，构建了一种新型的药物递送载体，增强了缺血性疾病的药物递送特异性。安徽外泌体载药实验