湖北外泌体载药原理

静脉注射修饰RVG神经元靶向肽的外泌体能透过血脑屏障，用于阿尔茨海默症的zhiliao。Alaarez-Erviti等通过基因工程技术使DC细胞分泌的外泌体膜上连接一个特异性RVG神经元靶向肽，从而使包载siRNA的外泌体顺利地靶向到脑中特定的神经细胞。研究结果显示，负载siRNA的RVG-EXOs可以使阿尔茨海默症相关BACE1mRNA下调61％，蛋白表达下调62％，明显降低β－淀粉样肽1-42水平。之后，COOper等利用相同的技术递送α－突触核dan白siRNA到转基因模型鼠中，致使大鼠中脑、纹状体、皮质层区域mRNA水平分别下调49％、56％、50％，相应的α－突触核dan白水平下调32％、26％、30％，而且能有效地抑制中脑区域α－突触核dan白的聚集，展示了外泌体用于脑部疾病zhiliao的巨大潜力。母乳外泌体改造后的载药体，不仅拥有外泌体本身的独特优点，还兼具改造后功能。湖北外泌体载药原理

外泌体载药系统中外泌体提取的方法有很多种，有差速超高速离心法、超滤法、试剂盒提取方法、磁珠免疫法等，但单一外泌体分离方法都有其不可解决的弊端，而联合不同的分离方法可得到更纯净、更丰富的外泌体。在装载连翘酯苷A(FTA)的外泌体递药系统的功效中的研究中，采用了差速离心法和超滤法提取外泌体，先使用超滤管浓缩细胞上清液，富集外泌体，再使用超高速离心提取外泌体，缩减了离心次数和时间，提高了外泌体提取效率，且整个过程简单易操作。同时采用低温超声孵育的方法制备FTA-Exos递药系统。云南外泌体载药公司外泌体载药后可以绕开Ｐ－糖蛋白，明显降低药物进入细胞后的外排作用。

外泌体直接载yao方式包括皂苷处理法、孵育法、冻融循环法、超声法和挤出法等。皂苷处理法指共培养外泌体、药物和皂苷溶液，然后通过透析膜、色谱柱纯化得到载药外泌体的方法。孵育法指药物和外泌体在适宜的条件下共培养。冻融循环法是经过冷冻、融化过程使外泌体包裹药物。超声法利用超声波使药物进入外泌体中，挤出法利用挤出机实现外泌体载带药物。其中皂苷辅助药物装载方法是直接载yao方式中常用的一种载yao方式。上述方法也存在一些缺点：孵育法操作简单，但载药量低；冻融循环法、超声法和挤出法对仪器的要求高，且可能会破坏外泌体的质膜结构造成药物泄露，终造成载药量不理想。

中流细胞通常过表达正常细胞中不存在的表面特异性受体，这些受体可能是其外泌体靶向中流细胞的基础。利用中流细胞外泌体对其表面特异性受体的识别，有望将zhiliao药物靶向传递到病变细胞，与普通细胞分泌的外泌体相比，可达到更高的靶向效率。临床上常见的肺ai病理学类型是非小细胞肺ai，其中A549细胞呈鳞状，含有高度不饱和脂肪酸，能够有效维持细胞膜完整性，可较好地模拟中流生长，因此被广fan用于体外研究。以A549中流细胞外泌体为载体，采用电穿孔法包载多烯紫杉醇，构建一种句有肺ai主动靶向性的递药系统，并采用响应面法优化了其载药工艺。包载厚朴酚的外泌体比游离厚朴酚有更高的zhiliao功效，可改善细胞摄取从而提高抗中流功效。

间充质干细胞外泌体（MSC-Exo）在外泌体载药中作为药物递送的载体具有独特优势。目前临床上普遍使用MSCs的原代细胞，虽然其可以产生大量的外泌体，但是对于大规模生产来说，它的增殖能力有限，产生的外泌体可能具有批次间的差异。Chen等人发现，使用c-myc转染人胚胎干细胞衍生的间充质干细胞(hESC-MSC)，能够在不影响外泌体生产质量的前提下，提高MSCs的增殖率，缩短生产时间。转染的hESC-MSC能够供应毫克范围内的外泌体，为生产具有生物学效益的外泌体提供了一定的可行性。此外，还可以对外泌体进行功能化修饰，进一步增强外泌体的作用优势。外泌体的功能化修饰能够延长外泌体的循环时间、增强外泌体在细胞质的递送效率和促使外泌体具有更强的靶向性。装载连翘苷（phil）的MHS来源外泌体具有完整茶托状膜结构的类圆形。湖北外泌体载药原理

外泌体作为药物载体可以载带多种蛋白质，实现靶向给药和稳定酶活性等目的。湖北外泌体载药原理

外泌体的脂质双分子膜可以保护其在血液循环中不被降解,但是这种膜结构以及其内含各种丰富的物质,使得外泌体载药变得困难。外泌体只有保证膜结构的完整性,才能不引起免疫反应,不被MPS吞噬。目前,将药物载入外泌体的方法主要有两种:(1)前转载,在分离外泌体之前,将药物与母代细胞共培养和对母代细胞进行转染,可以让母代细胞分泌含有药物的外泌体; 主要是用转染剂将“货物”转染进入亲代细胞(或者将“货物与亲代细胞孵育”),然后收集培养基,获得载有“货物”的外泌体的过程。该方法的主要问题是合适有效的转染试剂很少,且转染试剂无法完全去除,导致转染效率低,无法排除转染试剂对实验的影响。(2)后转载,分离出外泌体之后,将药物载入外泌体。湖北外泌体载药原理

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