湖南外泌体
外泌体运输的基因类药物也可以是miRNA,miRNA是一类非编码的内源性RNA,主要用于调节转录后的基因表达。miRNA主要通过与mRNA的未翻译的区域(UTRs)结合起到抑制基因表达和降解mRNA的作用。与siRNA不同,miRNA抑制mRNA的表达不需要完美的碱基配对,因此每种miRNA可以抑制多种蛋白质的表达,而每种siRNA只针对一种蛋白质。miRNA的运载也存在着种种挑战:miRNA体内稳定性差、生物分布不理想、易被体内酶降解以及容易引起副反应等。越来越多的研究表明外泌体也是体内运载miRNA的优良载体,并且利用外泌体运输miRNA的zhiliao方法已经在许多疾病模型中得以应用。外泌体是细胞通讯重要的调节者,疾病发生时,外泌体的组成会发生变化,在诊断和zhiliao方面均有重要作用。湖南外泌体
外泌体携带的与疾病进展紧密关联的分子标志物可用于疾病进展的监视、检测和诊断, 是一种潜在的非侵入性生物标志物。由于外泌体本身可以作为抗原提呈小泡, 且有较长的循环半衰期, 可用于免疫学相关研究, 同时, 源自ai细胞的外泌体可以被工程化, 发挥免疫刺激作用, 可作为中流疫苗应用于ai症的免疫zhiliao。此外, 外泌体稳定而广fan地分布在qi官和组织中, 具有低免疫原性、高耐受性等特点, 且良好的膜渗透性可使其通过血脑屏障, 因此可用作组织和qi官特异药物输送系统, 兼有高输送效率和低副作用。因此, 外泌体适合用作药物载体递送zhiliao剂(如阿霉素或姜黄素), zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白质, 运送至靶位点后实现靶向zhiliao。湖南腹水外泌体粒径检测PD-L1除表达于细胞膜外,还可以外泌体型或可溶型形式分泌到细胞外。
外泌体中包含的mRNAs和miRNAs在进入受体细胞后仍具有翻译蛋白质、促进病毒感ran等功能。据估计,单个外泌体含有约≤100拷贝数的蛋白质和≤10000拷贝数的核苷酸。不同细胞来源的外泌体中既包含与细胞形成、结构和物质转运相关的共有成分,也包含与来源细胞的生物功能相关的特异分子。如B淋巴细胞、树突状细胞、肥大细胞和肠上皮细胞来源的外泌体含有大量的主要组织相容性复合体蛋白质MHCclassⅡ和MHCclassⅠ,血小板和T细胞来源的外泌体则包含诸如血管性血友病因子、穿孔素和颗粒酶等特殊蛋白质,而ai细胞来源的外泌体表面可能含有中流特异的蛋白质分子。这类特异分子在外泌体介导细胞信号转导、参与生理病理过程中发挥至关重要的作用。
血清中的miR-122和miR-145非常不稳定, 将血清在4 °C短期保存期间即发生降解, 这可能是由外泌体的异质性所导致的。–80 °C保存被公认是保存各种生物标本如尿、牛奶、血液和支气管肺泡灌洗液适宜的保存环境, 虽然这样保存血浆可能产生含有大量“污染物”的外泌体。4 °C保存虽然容易导致外泌体中蛋白和核酸的损失, 但却能够避免冻融过程造成的囊泡破坏。外泌体虽然建议保存于-80 °C环境下, 但在处理或运输过程中有时很难维持这种低温条件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一种冻干法以保存外泌体, 在冷冻过程中使用海藻糖作为保护剂, 海藻糖可以提供生物保护作用, 如稳定蛋白质、细胞膜和脂质体; 减少冷冻过程中冰的形成; 防止蛋白质以及外泌体的聚集; 减少分离和保存过程中细胞外囊泡的损失等。双层囊膜结构(茶托状)是外泌体重要标志之一,但普通光学显微镜难以观察到此种亚显微结构。
间充质干细胞存在于骨髓、脂肪、脐血、牙髓、滑膜液等部位,是一种能够自我更新的多功能干细胞。间充质干细胞通过旁分泌的形式发挥其生理功能,而外泌体作为一种细胞间传递信息的介质,在间充质干细胞的功能行使中发挥了重要作用。研究发现间充质干细胞来源的外泌体能够修复组织损伤、抑制中流生长和调节免疫响应,具有zhiliao心肌梗死、自身免疫疾病、阿尔兹海默症等疾病的潜力。另外,也有研究显示间充质干细胞来源的外泌体会促进某些中流生长。血浆外泌体PD-L1除可影响患者预后外,还与免疫zhiliao的反应密切相关。山东外泌体Dir
示踪病毒使用CD81作为生物标记,通过将CD81与荧光蛋白偶联,带荧光的膜蛋白会在表达至外泌体膜上。湖南外泌体
在血液和大多数体液(如尿液、脑脊液、唾液、胸腹腔积液、羊水和乳汁等)中均可检测到外泌体。血液外泌体的检测通常采用EDTA抗凝血分离的血浆,miRNA等一些微小RNA则采用血清样本。泌尿系统中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs,但外泌体外膜则可帮助RNA免于被降解,因此研究尿液外泌体miRNAs更具有应用价值。相较于血清中相关miRNA的水平,脑脊液外泌体中的miR-21可作为胶质瘤诊断和预后的指标,特别对预测中流复发或转移具有价值。唾液样本在安静状态下主要来源于舌下腺和颌下腺,刺激状态下则主要来源于腮腺。湖南外泌体
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