新疆重点项目指南 外泌体载药

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——尺寸排阻色谱法。尺寸排阻色谱法时外泌体提取的一种方法，利用分子筛理论,开始是根据蛋白质分子大小分离蛋白质的色谱技术。该方法的主要优点是不需要很大的离心力,从而保证了外泌体的完整性。对比超高速离心和尺寸排阻色谱法得到的外泌体蛋白,结果显示, 尺寸排阻色谱法得到的外泌体的蛋白丰度高于超高速离心法。这些基于过滤或尺寸排阻色谱的新方法为外泌体大规模的生产和临床应用提供了可能。超滤也是根据外泌体的尺寸将其分离出来的一种方法,超滤一般被认为是外泌体分离过程中的一个准备过程,通过超滤除去大分子和小分子的蛋白质。不过连续的超滤可以分离出外泌体,和超高速离心相比,超滤不需要特殊的设备就可以较短时间内分离出外泌体。但是,超滤膜对外泌体的黏附作用会降低外泌体的产量,并且超滤过程中施加的外力可能会使外泌体变形或者破裂。外泌体可作为天然的药物运载系统，将zhiliao分子、药物等运送至靶细胞，进而发挥zhiliao作用。新疆重点项目指南 外泌体载药

中流转移是临床致死的重要原因,目前尚无特别有效的zhiliao手段。大蒜中的有效活性成分二烯丙基三硫化物(DATS)具有良好的抗中流转移作用,如何将其递送到转移灶发挥抗中流转移作用是亟待解决的关键问题。随着对生物来源载体的深入研究,中流细胞衍生的外泌体因其具有转移qi官亲和力和荷载小分子药物的性能从而引起关注。利用外泌体的载体性能和组织亲和性,提取肺转移中流细胞的外泌体用来包载DATS,以此制备转移灶靶向的载药系统,从而可以提高DATS的抗中流转移作用。安徽整体实验外泌体载药大概费用负载姜黄素的外泌体可经外泌体转运通过血脑屏障, 运送到脑组织中, 减轻氧化应激，维持脑血管屏障功能。

中流细胞的异常增殖和高迁移水平是恶性中流细胞发生转移的重要特征。通过实验可以用含药外泌体DATS-Exo、空白外泌体Exo和DATS处理B16BL6细胞24h后,然后采用MTT的方法检测细胞的增殖活性。实验结果显示,DATS-Exo与DATS都能够有效抑制B16BL6细胞的增殖,且与DATS组相比,DATS-Exo的抑制作用更强。通过经典的划痕法考察含药外泌体DATS-Exo的抑制中流细胞水平迁移能力，DATS-Exo组与DATS组相比具有更强的抑制效果。实验结果表明,将大蒜素DATS制备成外泌体载药系统是可以明显提高其体外抗中流细胞转移的能力。

β-榄香烯 (β-ELE) 是从莪术根茎中提取的一种新型的非细胞毒性抗中流药物, 句有疗效确切、低毒等特性, 能通过凋亡途径抑制肝ai细胞、乳腺ai细胞等多种中流细胞的增殖与迁移, 并能逆转中流细胞的多药耐药性, 增加对化疗药物的敏感性, 但其作用机制尚未完全阐明。目前研究认为第10染色体同源丢失性磷酸酶−张力蛋白基因 (PTEN) 能抑制多种ai症的发生, 并能增加耐药细胞对药物的敏感性。Zhang等人研究显示, 利用乳腺ai耐药细胞株与负载β-ELE的外泌体 (50 μmol·L−1/L, 30 h) 共培养, 分析发现负载β-ELE的外泌体上调了耐药细胞中miR-34a及其靶基因PTEN的表达, 并下调耐药miR-452和多药耐药基因蛋白P-gp的表达, 明显逆转了乳腺ai的耐药性。ai细胞的外泌体优先与其亲本ai细胞融合，具有靶向母体ai症的特点，可作为有效的载体包载药物。

miＲNA的运载也存在着种种挑战:miＲNA体内稳定性差、生物分布不理想、易被体内酶降解以及容易引起副反应等。越来越多的研究表明外泌体也是体内运载miＲNA的优良载体，并且利用外泌体运输miＲNA的zhiliao方法已经在许多疾病模型中得以应用。采用转染间充质干细胞的方法，使外泌体载有anti-miＲ-9。在进行间充质细胞和多形性成角质细胞瘤(GBM)细胞间anti-miＲ-9传递的实验时，发现两种细胞不jin可以通过缝隙连接介导的细胞间通讯(GJIC)也可以通过外泌体传递anti-miＲ-9。且anti-miＲ-9降低两种GBM细胞(U87和T98G)对中流药物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌体传递的anti-miＲ-9实现，而非经GJIC传递的anti-miＲ-9，显示出外泌体在运载miＲNA进行基因zhiliao时的潜力。装载紫杉醇的外泌体可有效抑制胰腺ai细胞的增殖。浙江动物血液样本外泌体载药大概费用

外泌体载药后可以绕开Ｐ－糖蛋白，明显降低药物进入细胞后的外排作用。新疆重点项目指南 外泌体载药

静脉注射修饰RVG神经元靶向肽的外泌体能透过血脑屏障，用于阿尔茨海默症的zhiliao。Alaarez-Erviti等通过基因工程技术使DC细胞分泌的外泌体膜上连接一个特异性RVG神经元靶向肽，从而使包载siRNA的外泌体顺利地靶向到脑中特定的神经细胞。研究结果显示，负载siRNA的RVG-EXOs可以使阿尔茨海默症相关BACE1mRNA下调61％，蛋白表达下调62％，明显降低β－淀粉样肽1-42水平。之后，COOper等利用相同的技术递送α－突触核dan白siRNA到转基因模型鼠中，致使大鼠中脑、纹状体、皮质层区域mRNA水平分别下调49％、56％、50％，相应的α－突触核dan白水平下调32％、26％、30％，而且能有效地抑制中脑区域α－突触核dan白的聚集，展示了外泌体用于脑部疾病zhiliao的巨大潜力。新疆重点项目指南 外泌体载药

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