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病理实验外包，病理染色多聚甲醛保存组织的注意事项：多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸，使溶液pH降低，从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中，固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留，因此后续实验结果如果受醛基影响，须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。病理实验外包检测那些事儿，南京英瀚斯生物。黑龙江专门做病理实验外包实验室

病理实验外包，病理染色常见染色介绍普鲁士蓝染色：普鲁士蓝染色（Prussianbluereaction）又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁**钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞内会间质内，主要显示三价铁盐。Perls普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应，是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法，其染色原理为：亚铁**钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁**钾反应，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁**物普鲁士蓝，所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁**物是一种很稳定的化合物，在反应后可用红色染色剂进行复染，如核固红、伊红、中性红等。Perlsstain常用于显示局部组织内各种出血***变，常见于吞噬细胞内。在判断含铁血黄素沉积时，用Perls反应可以得到证实，该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。新疆生物病理实验外包实验室病理实验外包检测(小鼠***成像/药代动力学/动物造模)技术服务。

病理实验外包常见染色介绍Warthin-Starry银染：Warthin-Starry银染染色原理在于螺旋体表面的黏蛋白与银结合，呈黑色。染色结果：菌丝及颗粒呈黑色，背景呈黄色。银染一种是检测聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法，其原理是银离子在碱性pH环境下被还原成金属银，沉淀在蛋白质的表面上显色。银染的方法种类很多，有文献报道的就有100多种。但是其准确的染色机制还不是特别地清楚。由于银染的灵敏度很高，可染出胶上低于1ng的蛋白质点，故普遍地用在2D凝胶分析上，及极低蛋白含量测定的垂直凝胶中。主要是用于垂直凝胶电泳中低丰度蛋白的检测，如内源性GST-Pulldown、Co-IP等实验中相互作用蛋白的研究。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。

病理实验外包，染色包埋的知识：知识点1：包埋的概念组织经过固定、脱水、透明和浸蜡等过程后，用包埋剂（石蜡、火棉胶、树脂等）将组织块包埋成块，使得组织和包埋剂相熔一体并迅速冷却，这个程序称为包埋。知识点2：组织石蜡包埋法石蜡包埋法是制作光学显微镜切片的常规方法，包埋后的组织可以长期保存。包埋的方法有包埋机包埋和手工包埋两种。知识点3：体液石蜡包埋法痰液、胃液、尿液、胸腔积液、腹水等可以行石蜡包埋。痰液应当选用含血液的部分或较为可疑的实体部分，滴上伊红后用皱纹纸包好，然后用10%的中性甲醛固定，再经常规脱水，透明、浸蜡并包埋。新鲜的胃液、尿液、胸腔积液、腹水等体液标本，倒去上层的澄清液体，将浑浊的液体放入离心管中，以转速2000-3000转每分钟离心15分钟，倒去上清液后，用10%中性甲醛固定沉淀物，然后进行脱水透明、浸蜡、包埋。实验外包、病理实验外包检测、细胞实验外包、分子实验外包。

病理实验外包，病理染色常见染色介绍TUNEL染色：基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法检测细胞凋亡的原理。实验步骤使细胞或组织贴在载玻片上➜固定➜洗涤➜通透➜洗涤➜预平衡➜用荧光素12-dUTP标记断裂的DNA链➜终止反应➜洗涤➜封片➜分析样品南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包，医学实验外包，动物实验外包，就找南京英瀚斯。安徽比较好的病理实验外包检测

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●原因：①组织脱水，透明不够。②浸蜡时间过长、浸蜡温度过高。③组织脱出是由于脱水、透明时间不够，或组织中含有乙醇等，石蜡不易渗入组织中故导致石蜡与组织分离。④二甲苯使用时间过久。●解决方法：①必须按组织大小厚薄选择脱水、透明时间。②依组织的性质和结构特点确定浸蜡时间、控制包埋温度。一般这种情况难以补救。③脱水，透明渗蜡不够，应重新熔化，退回入二甲苯和酒精，再进行渗蜡包埋。④更换二甲苯。2.切片皱褶太多且不能完全展开●原因：①石蜡太软或室温过高。②切片刀上粘有残余的石蜡，刀口不干净。③组织浸蜡时间不够或脱水、透明不够。④切片刀不锋利。●解决方法：①可将蜡块放入冰箱中冰冻后切片。并在切片时一边切片一边用冰块冰冻或换蜡。如室温过高，可开空调降低室温。②切片刀不干净，可用棉花沾少许二甲苯将刀口拭干净。③组织浸蜡不够，可重复浸蜡过程。④将切片刀磨锐利再行切片。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。黑龙江专门做病理实验外包实验室

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