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病理实验外包,病理染色多聚甲醛保存组织的注意事项:多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。南京病理实验外包检测,优先南京英瀚斯。贵州专业的病理实验外包
病理实验外包,病理染色常见染色介绍番红-固绿(骨)染色:番红O-固绿染色可直观反映关节软骨、软骨下的骨组织结构,软骨呈红色,成骨呈绿色,对比鲜明,区分清晰,在关节软骨及软骨下骨的形态学研究中备受青睐。嗜碱性的软骨组织与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨组织和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色。本质上,番红O与蛋白聚糖中的多聚阴离子物质(硫酸软骨素和硫酸角质素)成正向比例结合(离子浓度),不与胶原结合,可间接反应基质中蛋白聚糖的含量与分布。正常的软骨基质分布均匀一致,当软骨受到损伤时,创伤刺激可使软骨基质中糖蛋白立即释放活化,使基质成分发生变化,导致番红O淡染,甚至失染。固绿可与结构疏松的胶原纤维牢固结合,不宜褪色。简要流程:石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→固绿染色→番红O染色→脱水、透明、封片(中性树胶)→番红O-固绿染**(成骨呈绿色,软骨呈红色)。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。浙江专门做病理实验外包实验室病理实验外包检测 [南京英瀚斯] 一站式病理实验外包检测平台。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍茜素红染色:茜素红S(AlizarinRedS)钙染色法是一种旨在通过鳌和技术,使钙离子和茜素红S产生复合物,来分析固定处理的细胞样本中橘红色钙沉积现象的**而经典的技术方法。主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。普遍用于骨细胞或组织病理生理的研究。茜素红S是橙黄色的针状体。溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿和苯。1%水溶液pH2.15。由茜素经发烟硫酸磺化,然后转变为钠盐制得。属一种蒽醌(Anthraquinone)类的衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与钙盐以鳌和方式形成复合物,用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过茜红素染色,产生橘红色沉积。茜素红S是一种蒽醌类衍生物可与钙盐螯合形成橙红色复合物。该染色可用于血管钙化的检测。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。
●原因:①组织脱水,透明不够。②浸蜡时间过长、浸蜡温度过高。③组织脱出是由于脱水、透明时间不够,或组织中含有乙醇等,石蜡不易渗入组织中故导致石蜡与组织分离。④二甲苯使用时间过久。●解决方法:①必须按组织大小厚薄选择脱水、透明时间。②依组织的性质和结构特点确定浸蜡时间、控制包埋温度。一般这种情况难以补救。③脱水,透明渗蜡不够,应重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再进行渗蜡包埋。④更换二甲苯。2.切片皱褶太多且不能完全展开●原因:①石蜡太软或室温过高。②切片刀上粘有残余的石蜡,刀口不干净。③组织浸蜡时间不够或脱水、透明不够。④切片刀不锋利。●解决方法:①可将蜡块放入冰箱中冰冻后切片。并在切片时一边切片一边用冰块冰冻或换蜡。如室温过高,可开空调降低室温。②切片刀不干净,可用棉花沾少许二甲苯将刀口拭干净。③组织浸蜡不够,可重复浸蜡过程。④将切片刀磨锐利再行切片。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测服务介绍,医学造模以及评价。
病理实验外包,病理染色网状纤维染色Gordon-Sweets银氨染色法黑色:网状纤维红色:胞核(核固红复染)黄棕色:胶原纤维淡红色:细胞质(红液复染)弹性纤维染色Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果比较好显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色:弹性纤维红色:胶原纤维黄色:背景糖类染色过碘酸-Schiff(PAS)染色法红色:糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色:细胞核南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。英瀚斯生物细胞实验外包。病理实验外包检测,就找南京英瀚斯。贵州专业的病理实验外包
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病理实验外包,病理染色常见染色介绍VonKossa染色:简介:钙结节的形成为成骨细胞特有,Vonkossa染色法是染色矿化结节的经典方法,利用硝酸银与钙盐的复分解反应形成可被还原的银盐,在强光或紫外光下或者强还原剂作用下使其还原为黑色的金属银。简要流程:石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→硝酸银滴染→苏木素染核→伊红染色→脱水、透明、封片(中性树胶)→Vonkossa染**(钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,细胞核呈蓝色,背景呈红色;或者钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,背景呈红色)。VonKossa染色利用金属离子置换反应检测组织中钙盐沉积,由硝酸银溶液中的银离子置换组织中沉积的钙离子。该染色可用于血管钙化的检测贵州专业的病理实验外包
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