浙江HE染色报告

HE染色实验步骤：（1）样品制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1×105/ml，滴加于盖玻片上(置于6孔板中)，培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS洗涤3次。（2）样品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。（3）染核：苏木素染液染色2-3min，自来水洗涤。（4）分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。（5）染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。（6）吹干或自然晾干细胞爬片后，中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min即可常规HE染色和特殊染色服务。浙江HE染色报告

HE染色反蓝的原理：苏木素染液，细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的双螺旋结构中，两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。 分化：苏木素染色之后，用水洗去未结合在细胞上的染液，但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液1%盐酸酒精脱去，才能保证细胞核和细胞浆染色的分明，把这个过程称为染色的分化作用。因酸能破坏苏木素的醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。蓝化：分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，在碱性条件下处于蓝色离子状态，而呈蓝色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木精染上的细胞核变呈蓝色，称蓝化作用，一般多用自来水浸洗即可变蓝，也可用温水（50度温水比较好）变蓝。内蒙古比较好的HE染色报告脾脏组织HE染色如何观察。

HE染色知识点1：对送检组织标本的要求送检组织标本在手术切除或活检后应当立即放入4%中性缓冲甲醛溶液中固定。尸检标本应当尽量在死亡后尽早取材固定。送检组织需要全部取材的，应当在送检单上注明，有特殊要求（如细菌培养、解释道化学分析等）应当事先联系，并且在标本未固定前进行处理。知识点2：组织取材要求在对送检组织标本进行详细检查的基础上，根据诊断的需要，确定取材的部位和块数。切取的组织应当按照不同的部位分别给予不同的编号或标记，以便镜检时核对。另外，尽可能在取材前对有意义的标本的表面及剖面镜下摄影，并编号存档南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。

HE染色就是用苏木精和伊红对细胞内的核糖体和细胞质染色的方法。H:Hematoxylin，苏木精E:Eosin，伊红苏木精（Hematoxylin,H）是一种碱染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，被碱染料染色的结构具有嗜碱。伊红（，E）是一种酸染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸染料染色的结构具有嗜酸。染色前，须用二甲苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，***入蒸馏水，就可染色。 很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行变则呈现嗜伊红浓染。 胶原纤维在老化和出现透明变时，伊红着色由浅变深。骨组织HE染色的操作流程。

HE染色脱蜡不净的原因及验证方法：1)二甲苯使用过久，含蜡成分太高或脱蜡效果差：可更换二甲苯验证。2)切片经烤片，冷却后放入二甲苯脱蜡或室温太低；延长拖拉时间或用热的切片脱蜡验证。3)脱蜡时间太短或振荡太少，幅度太小；可延长脱蜡时间或以多振荡来验证。4)洗涤二甲苯用的乙醇使用时间过久，导致乙醇中二甲苯含量过高，二甲苯残留在切片上（由于二甲苯与水不相溶，切片上有二甲苯的地方，苏木精就没有办法渗透进去，在切片染色完成后留下了点状的不着**域）：更换各道乙醇验证。5)二甲苯、乙醇质量不佳（偶有试剂瓶内装的试剂与试剂名不相符）：换批号验证。6)更换脱蜡液体时试剂拿错：需重新配置验证。7)更换脱蜡液体时试剂次序放错：需重新配置验证。8)烤片时间短，切片上水分没有烤干，也会导致着色不匀，出现点状发白区域。HE染色的基本原理和结果分析。浙江HE染色报告

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HE染色细胞质过染分析及应对原因：（1）伊红染色液浓度太高，特别是焰红燃料、四溴四氯荧光素钠的存在；（2）切片在伊红染色时间过长；（3）切片在伊红染色后经乙醇脱水步骤时过的太快，而使乙醇分化伊红的作用不能产生。对策：适当稀释伊红染色液，减少伊红染色时间，或者使切片在乙醇脱水等步骤时，停留时间相对均匀。同样，也要检查切片的厚度是否合适。切片中出现蓝黑色沉淀物分析及应对原因：苏木精染色液中的金属膜，黏附在玻片上。对策：每天染色前仔细过滤苏木精染色液，或建议使用半氧化苏木精染色液，如Gill苏木精染色液,可以避免过多的金属膜产生。浙江HE染色报告