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鼠尾胶原,10mg包装,配制方法如下:1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超纯水至100ml,容量瓶配制比较准确。2.用吸管吸取10ml刚配好的0.1M乙酸溶液(不要用*加,吸十次不如加一次z准确),加入盛胶原的瓶中,轻轻颠倒,不要震荡,蛋白容易起泡。几分钟即可,蛋白质非常好溶解。3.将胶原溶液移入事先压好的玻璃瓶中,比青霉素瓶大点的就行。用*在瓶底加1ml氯仿,打到一档就行,避免加入气泡。然后4度过夜除菌。4.第二天将上层胶原溶液分装进EP管中。用封口膜封口,4度保存,勿冷冻。它可以用于监测小鼠血液成分的变化,确糖尿病或者某些能够改变小鼠的血糖等。北京正规鼠尾胶原服务电话
对于生物科研汪们来说,大白鼠、小白鼠们简直浑身是宝,从毛发、皮肤,到心肝脾肺,甚至各种排泄物,都是我们重要的研究对象。尾巴,自然也是。所以耗子尾汁不仅存在,甚至是我们生物实验中必不可少的实验材料和实验对象。有不少人靠「耗子尾汁」发了CNS和顶刊。没有「耗子尾汁」,很多课题可能都没办法开展。在以小鼠为模式生物进行科学研究的实验室中,日常和基本的一个实验就是提取它们的遗传物质—DNA(脱氧核糖核酸)进行基因型鉴定,检测这些小动物的基因组中是否含有特定的DNA。可以理解为给小动物做核酸检测。开封鼠尾胶原厂家直销制备鼠尾胶原:吸取上清,分装成小瓶,4℃保存。
鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿,培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶,模拟真实的生长环境,使细胞在三维环境中生长。1,在使用鼠胶原蛋白型包被的细胞培养皿中检查到PC-12细胞的贴壁和生长。1mg/ml浓度以上,pH左右时可形成具有一定强度的三维胶,检查到NIH-3T3细胞在三维胶内正常生长、PC-12细胞在三维胶表面正常生长。使用方法:1、细胞培养器皿的表面包被推荐浓度:1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格体积加到相应的培养器皿中。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。
鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上,pH7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成胶过程中需要加入0.06X体积的0.1mol/LNaOH来中和。需要的溶液(均需要无菌、预冷):10xPBS(可含10mg/L的酚红用于pH指示)或10x培养液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),双蒸水不含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):将200ul生友鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入100ul10xPBS或10x培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。鼠尾胶原醋酸溶解:不要晃动或搅拌。
鼠尾Ⅰ型胶原:选择适当的骨修复材料是治好骨缺损的中心环节。目前,临床上常用的有人工骨移植、自体骨移植和同种异体骨移植。其中,人工骨材料多为磷酸三钙、半水硫酸钙等含有钙和磷的无机矿物材料[1-2],由于不含自体骨组织中的有机大分子Ⅰ型胶原蛋白,其临床疗效远远低于自体骨组织。但是,自体骨移植和同种异体骨移植均来源于人类自身骨组织,数量有限,难以满足临床需要。因此,研发与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料,成为全世界骨组织工程学者孜孜以求的目标。由于天然骨组织是Ⅰ型胶原蛋白和羟基磷灰石钙生物矿化的产物,在分子结构上,羟基磷灰石钙晶体是以Ⅰ型胶原纤维为模板,呈片状镶嵌在胶原纤维分子间隙,沿着胶原纤维的长轴纵向矿化生长[3]。本研究仿生天然骨组织的分子结构,酸解提取鼠尾肌腱的Ⅰ型胶原蛋白,重构形成Ⅰ型胶原纤维,然后将Ⅰ型胶原纤维放置在矿化液中模拟人体内骨生物矿化,通过透射电子显微镜(TEM)和电子衍射观察羟基磷灰石钙晶体在胶原纤维内部的骨生物矿化。利用鼠尾Ⅰ型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。昆明正规鼠尾胶原厂家直销
胶原蛋白(Collagen)是结缔组织和内脏部位外基质的主要成分。北京正规鼠尾胶原服务电话
实验应用:鼠尾胶原在原代培养耳蜗血管纹边缘细胞中的应用。目的:建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。方法:制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。结果:自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞,细胞角蛋白18表达阳性,免疫组织化学结果和扫描电镜证实所培养的细胞具有典型的分泌上皮细胞特征。结论:成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法,并且制作简便,成本低廉。北京正规鼠尾胶原服务电话
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