温州鼠尾胶原

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用说明：不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。结论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁。温州鼠尾胶原

一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法并在说明书中给出了原因：“一般的生物体中提取的胶原蛋白多为混合型，之前多从牛皮、猪皮、牛腱中提取，但这类胶原蛋白不仅有油脂等其他杂质，也存在着II型及其他一些胶原蛋白亚型；同时，这种畜牧业大量饲养的动物存在着例如疯牛病等一些生物性疾病及病毒，如果用此开发医用产品更加存在着品质的不稳定及潜在的风险及危害。”至此，想必“耗子尾汁”在知识产权界的名声又亮了一些。南昌鼠尾胶原销售厂家制备鼠尾胶原：取大鼠尾巴洗净，75%酒精浸泡5分钟。

生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法，采用酸法与酶法相结合的工艺，保持恒低温无菌的环境，利用同样浓度的盐溶液进行两次盐析与离心，简化了提纯步骤。所用酸为低浓度酸溶液，并采用柠檬酸替代醋酸进行提纯。从提取原料到样品生成过程中，进行多次真空冷冻干燥，并经进一步处理获得含水率在3％以下的胶原蛋白微粉；较后由灭菌、无菌包装，成品胶原蛋白粉末的纯度在98％以上。本发明获得的胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性，提高了产率和生物相容性，降低了成本，适用于生物医用材料，所得到的胶原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋结构。

胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同，每一条亚基形成一股左手旋转的螺旋，其中每3个氨基酸残基形成一圈螺旋。3条左手螺旋再扭在一起形成一个右手大螺旋。这样的螺旋称为3股螺旋。小的甘氨酸残基位于3股螺旋内部。3股螺旋式的棒状胶原分子的大小约是3000×15埃，这些棒状分子首尾相连，并侧向排列形成胶原微丝（其直径可从50埃至数千埃）。胶原分子在两端及沿轴向每隔680埃的距离存在极性区，这些极性区能和重金属离子结合，使胶原纤维在电子显微镜下形成间距为680埃的明暗相间的特征性的横纹结构。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。鼠尾胶原为贴附底物人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式的成功建立。

三维胶原的制备：鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上，pH7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06X体积的0.1mol/LNaOH来中和。需要的溶液(均需要无菌、预冷):10xPBS(可含10mg/L的酚红用于pH指示)或10x培养液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),双蒸水A．不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。手持尾巴，用止血钳夹住鼠尾的较高，折断尾骨后拉出尾腱。芜湖正规鼠尾胶原厂家推荐

鼠尾胶原蛋白 型在浓度1mg/ml 以上， pH 左右时可形成具有一定强度三维胶。温州鼠尾胶原

胶原蛋白的提取方法：1.碱法提取：碱法提取胶原蛋白常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等。如Holzer等[5]采用1%～1.5%石灰水浸泡的方法提取胶原蛋白。由于它容易造成肽键水解，因此得到的水解产物分子量比较低。所以，若想保留胶原的三股螺旋结构，此法不可取。2.盐法提取：盐法提取胶原蛋白所用的中性盐有盐酸-三羟甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化钠、柠檬酸盐等。在中性条件下，当盐的浓度达到一定量时，胶原溶解。并且可采用不同浓度的氯化钠对提取的胶原蛋白进行盐析处理，可以沉淀出不同类型的胶原蛋白。温州鼠尾胶原