上海正规鼠尾胶原报价

鼠尾胶原备用胶凝程序：1）在冰上放置以下物品：胶原蛋白I、无菌10×PBS、无菌蒸馏水、无菌1MNaOH。2）确定胶原蛋白I待使用溶液所需的较终浓度的体积。3）在冰上放置无菌管以收存胶原蛋白I。4）在无菌条件下执行以下步骤。4.1加入10×PBS（终体积/10）mL4.2计算要使用的胶原蛋白I的体积（不要添加到管中直到步骤4.6为止）终体积x终胶原蛋白I浓度（mg/mL）。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的胶原体积×0.023）mL的无菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述体积的无菌冰冷蒸馏水：添加蒸馏水体积=V（终）—V（胶原蛋白）—V(10×PBS）—V（1MNaOH）4.5混合管中的物质并放入冰中。4.6加入胶原蛋白I并计算体积，混匀，冰上备用。5）胶原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小时。6）使用时，无菌条件下将溶液加入到细胞培养装置中37°C凝胶30min。从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。上海正规鼠尾胶原报价

鼠尾胶原蛋白的提取方法：1.一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步骤:(1)将无组织纤维、脂肪和多糖残留的鼠尾腱，真空冷冻干燥备用；(2)冻干鼠尾腱经低温冻干粉碎至200〜400目；(3)在冰水浴中将粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶胀，鼠尾腱与醋酸的固液比为I克:10mL〜I克:120mL，期间不断搅拌，防止冻结成块，得到胶原溶胀液；(4)称取胃蛋白酶加入到胶原溶胀液中，鼠尾腱与蛋白酶质量比为50:I〜100:1，在4°C，48〜74小时酶解，期间间歇性搅拌。深圳正规鼠尾胶原进货价鼠尾胶原醋酸溶解：稀释一定数量的胶原溶液。

鼠尾胶原简介：鼠尾I型胶原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备，纯度达到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被，特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养；也可用于制备三维胶原凝胶，使细胞在模拟的三维环境中生长。质量标准：1、SDS-PAGE分析纯度大于95%。2、无菌检验结果为阴性。3、本品2μg/cm2包被细胞培养皿后培养PC-12细胞，贴壁及生长正常。4、本品浓度1mg/mL，pH7.0时形成具有一定强度的三维胶原凝胶，NIH-3T3细胞在三维凝胶内生长正常、PC-12细胞在三维凝胶表面生长正常。

I型鼠尾胶原是借鉴NavneetaRajan,JasonHabermehl法，经过乙酸抽提、离心、灭菌、透析等步骤制备得到的高纯度、高活性胶原蛋白，属于医药级别产品，可用于包被细胞培养器皿（单分子层包被），适合多种类型细胞的贴壁如肝脏细胞、神经节细胞、胚胎细胞、肌细胞、肺细胞、神经鞘细胞等。I型胶原蛋白包被细胞培养板，规格为6/24孔板，表面经I型胶原蛋白包被，可以很好的降低蛋白质的吸附。使用这种细胞培养板培养细胞，可以获得良好的细胞贴壁率，细胞增殖速度快，形态均一，细胞培养成功率高。制备鼠尾胶原：吸去生理盐水，将尾腱称重（0.5-1克）。

实验应用：鼠尾胶原在原代培养耳蜗血管纹边缘细胞中的应用。目的：建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。方法:制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。结果：自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞，细胞角蛋白18表达阳性，免疫组织化学结果和扫描电镜证实所培养的细胞具有典型的分泌上皮细胞特征。结论：成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法，并且制作简便,成本低廉。制备鼠尾胶原：将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡。徐州鼠尾胶原供应商

通常情况下骨质总量中的钙、镁、磷等无机物质光占总量的百分之几而胶原蛋白等有机物质却要占超过80%。上海正规鼠尾胶原报价

胶原蛋白的提取方法：酶法提取：酶法提取是利用蛋白酶使胶原溶解，水解条件温和，反应速率快，提取的胶原蛋白仍有完整的三股螺旋结构，蛋白纯度高，理化性质稳定，且无环境污染。酶法提取常用的蛋白酶有：胃蛋白酶、胰蛋白酶或者复合酶。工艺可选择一步法，即利用酶液直接提取；二步法，即先用酸或者碱进行初步提取，然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO预处理革屑，然后用碱性蛋白酶提取胶原的水解产物。CabezaL.F.T等[7]先用胃蛋白酶，再用碱性蛋白酶提取了2种不同的胶原水解产物。赵苍碧等[2]采用胃蛋白酶和无花果蛋白酶消化法从牛腱中提取胶原蛋白，探讨了酶和酶的加入量对提取结果的影响，给出了酶对胶原提取较佳工艺配比，酶与牛腱的质量比为0.1时效果较佳，而使用无花果蛋白酶时，0.01的配比较佳。上海正规鼠尾胶原报价