南京广州RNA提取试剂

RNA提取试剂TRIpure是基于世界上使用较普遍的异硫氰酸胍/酚法研制而成的总RNA抽提试剂。在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。无论是人、动物、植物还是细菌组织，该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIpure试剂操作上的简单性允许同时处理多个样品，所有的操作可以在一小时内完成。TRIpure抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染，故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆等。和进口品牌实验对照显示，公司的产品质量已经达到甚至超过了进口产品的质量~移去水相后，用乙醇可从中间相沉淀得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。南京广州RNA提取试剂

总RNA的定义：总RNA=mRNA+tRNA+rRNA，即：总RNA就是指mRNA、tRNA、rRNA的总和。这是在还没有发现lncRNA等microRNA的时候的概念。但是却被各大公司默认的概念，一直延续至今。所以各位可以去各大公司的网站，看一看总RNA提取试剂盒案例提供的RNA电泳图，只有表示总RNA的2条带——28s和18s；表示microRNA的5s带，要不没有，要不很弱。那么mRNA在哪里呢？从RNA电泳图上能不能看到呢？真正成熟的mRNA，主要集中在28s和18s之间和上下的荧光背景（一般每条基因mRNA量很少，所以，整体一般看不到明显带，只表现为28s和18s中间和上下的连续的涂抹带）。青岛RNA提取试剂厂家直销异硫氰酸胍属于解偶剂，是一类强力的蛋白质变性剂，可溶解蛋白质。

动物细胞RNA提取：1、悬浮细胞：可直接离心后弃掉培养基，用无菌PBS清洗1~2遍后，再用适量PBS悬浮起来，然后再加入裂解液进行裂解。千万不要完全弃掉液体后，往沉淀细胞里直接加入裂解液，这样会使外表层的细胞裂解后释放的组蛋白包裹粘附在沉淀细胞外侧，从而限制沉淀内部的细胞与裂解液的接触，从而导致细胞裂解不彻底，降低RNA得率。2、半贴壁或贴壁不紧的细胞：弃掉培养基后，用PBS洗1~2次，然后直接吸取适量PBS用吸管或者泵吹打培养皿，把细胞吹下来，转移到无RNA酶的EP管中，加裂解液进行提取。3、贴壁细胞：需要先用胰酶消化，然后收集到无RNA酶的EP管中，离心去其上清，用PBS洗1~2次，去除多余的胰酶，以适量PBS重悬后继续进行提取步骤。

血浆/血清中miRNA提取试剂盒：是专门针对血清、血浆样本中miRNA提取而开发的，利用吸附柱法从血清、血浆样品中简单快捷提取高纯度高质量的miRNA。该试剂盒中的裂解液miRBP1及柱结合液miRBP2具有高效裂解及提取效果。试剂盒中的吸附柱采用特殊的硅基质膜材料，对RNA尤其是smallRNA（<200nt）具有结合能力，与常用的抗凝剂（包括肝素、EDTA、柠檬酸钠、草酸钠）兼容，得到的miRNA可直接用于RT-PCR和Northern杂交等后续分子生物学实验操作。普通植物总ＲＮＡ提取试剂盒：采用进口硅基质膜制作的总RNA吸附柱，可以从普通植物的根、茎、叶中快速提取总RNA，30~40分钟内即可完成提取过程，提取的总RNA纯度高，没有DNA和蛋白质的污染，适用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot杂交等实验。总RNA吸附柱保证RNA提取速度快，提取效率高。高效去除植物组织中的色素、酚类等杂质，提取RNA的纯度高，产量大。他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到较低程度。

RNA是核糖核酸，DNA是脱氧核酸。区别：紫外吸收：核酸的λm＝260nm，碱基展开程度越大，紫外吸收就越厉害。当A＝1时，DNA：50ug/ml，RNA和单链DNA：40ug/ml，寡核苷酸：20ug/ml。用A260/A280还可来表示核酸的纯度。沉降速度：对于拓扑异构体（核苷酸数目相同的核酸），其沉降速度从达到小依次为：RNA;超螺旋DNA>解链环状DNA;松弛环状DNA;线形DNA也就是在离心管中较上层是线形DNA，较下面是RNA。电泳：核苷酸、核酸均可以进行电泳，泳动速度主要由分子大小来决定，因此，电泳是测定核酸分子量的好方法。DNA分子量测定较直接的方法：用适当浓度的EB（溴嘧啶）染色DNA，可以将其他形式的DNA变成线形DNA，用电镜测出其长度，按B-DNA模型算出bp数，根据核苷酸的平均分子量就可计算出DNA的分子量。RNA提取试剂注意事项：溶液需用DEPC水配制。青岛RNA提取试剂厂家直销

较佳方法是保证样品完全裂解，但相同的裂解方案换了一个样本可能就没辙了。南京广州RNA提取试剂

RNA提取浓度不高或质量不佳原因及解决办法：1、得率过低：提取样本过低总量不足或者提取样本过多裂解不彻底；应当使用适当质量的组织或细胞进行提取，样本前处理一定要做好，裂解应充分。2、基因组残留：Trizol法提取时，分层后吸取上清时吸到中间层会带来严重的基因组污染；分层吸取时应当格外小心，不要吸取到中间层。如果是采用柱式法提取，可选择含有DNaseI的试剂盒进行提取，吸附在膜上的核酸直接用DNaseI进行消化，可极大限度的降低DNA残留。南京广州RNA提取试剂