武汉纺锤体实时成像纺锤体胚胎发育

卵母细胞纺锤体对低温环境极为敏感，冷冻过程中可能发生的冰晶形成、溶液浓缩等物理化学变化均会对纺锤体造成损伤，导致其形态异常、稳定性下降。在冷冻和解冻过程中，纺锤体微管可能发生解聚和重聚，这一过程不仅影响纺锤体的形态，还可能破坏其内部结构和功能，进而影响卵母细胞的发育潜能。为了减轻冷冻损伤，研究者们尝试在冷冻液中添加细胞骨架保护剂，如紫杉醇等。然而，保护剂的选择、浓度及作用机制仍需进一步研究和优化。纺锤体微管的排列和稳定性受到细胞骨架的支撑。武汉纺锤体实时成像纺锤体胚胎发育

纺锤体生成

      在含中心体的细胞中，纺锤体的生成开始于细胞分裂前初期 - 即在细胞核膜分解(Nuclear Envelope Breakdown, NEB)之前。初期的结构为两个**的以中心体为核的星状体(asters)。当细胞核膜分解后，染色体和星状体发生一系列复杂的互动反应。**终结果为所有的染色体在纺锤体的**(赤道板,)排列整齐，每两条染色体有一个着丝点，每一个着丝点被一束极性相同的微管（通常称为纺锤丝）附着。此时细胞处于分裂中期，纺锤体生成完毕。实验证明，中心体在这个过程中的作用不是必需的。动物细胞在中心体被激光捣毁后仍旧能够筑构纺锤体，但其位置通常不在细胞的大致几何中心，其后的胞质分裂也会受严重影响。纺锤体 [1]

       在不含中心体的细胞中，纺锤体的生成是由染色体本身主导的。此过程由一小分子量的GTP连接蛋白（Ran GTPase）控制。细胞核分解后，纺锤丝由染色体周围生成。其后这些纺锤丝会在动力分子与为微管动力的合作影响下自动排列为极性相反大致数目相同的两组。每组的极性相对于一组着丝点。同时在微管远端的动力蛋白 dynein 会将这些微管束集中到一点，形成纺锤极区(Spindle Polar Zone)。与此同时，染色体会自动在赤道板排列整齐。纺锤体生成完毕。 美国Hamilton Thorne纺锤体改善分级纺锤体在细胞分裂中的功能受到严格的时间和空间控制。

冷冻与解冻过程中涉及多个环节，包括温度控制、时间控制、冷冻保护剂的添加与去除等。这些环节中的任何一步操作不当都可能导致纺锤体损伤。因此，需要不断优化冷冻与解冻技术，以减少对纺锤体的不良影响。近年来，研究者们通过不断尝试和优化冷冻保护剂的配方，取得了进展。例如，甘油、二甲基亚砜（DMSO）等渗透性保护剂被用于哺乳动物卵母细胞的冷冻保存中，它们能够迅速降低细胞内水分含量，减少冰晶形成。同时，一些非渗透性保护剂如蔗糖、海藻糖等也被发现对纺锤体具有一定的保护作用。

无需染色纺锤体观察技术能够实时监测冷冻过程中纺锤体的形态变化，从而准确评估冷冻保存的效果。通过对比冷冻前后纺锤体的形态和稳定性，研究者可以优化冷冻保护剂的配方和浓度，以及改进冷冻程序，减少冷冻损伤，提高解冻后卵母细胞的存活率和发育潜能。解冻后的卵母细胞在无需染色的情况下，可以直接通过Polscope系统进行纺锤体观察。这一技术能够迅速评估解冻后卵母细胞的质量，包括纺锤体的形态、位置、稳定性等关键指标，为后续的受精和胚胎发育提供重要参考。在有丝分裂中，纺锤体形成并维持着染色体的稳定性。

哺乳动物卵母细胞的纺锤体由微管组成，这些微管结构精细且高度动态，对温度、渗透压和机械力等外界因素极为敏感。在冷冻过程中，纺锤体容易因冰晶形成、渗透压变化或机械损伤而遭到破坏，导致染色体分离异常，进而影响卵母细胞的发育潜力和受精后的胚胎质量。选择合适的冷冻保护剂是减少纺锤体损伤的关键。然而，不同浓度的冷冻保护剂对纺锤体的影响各异，且不同哺乳动物种类之间也存在差异。因此，需要通过大量实验来优化冷冻保护剂的配方，以大限度地保护纺锤体的完整性。纺锤体在细胞分裂中的功能受到细胞内外环境的共同影响。昆明MII期纺锤体胚胎发育

纺锤体的一端连接着染色体，另一端则锚定在细胞两极。武汉纺锤体实时成像纺锤体胚胎发育

纺锤体是如何形成的（2）

       动粒微管连接染色体动粒与位于两极的中心体。在有丝分裂前期，一旦核被膜解聚，由相反两个方向的中心体伸出的动粒微管就会随机地与染色体上的动粒结合而俘获染色体，微管**终附着在动粒上，动粒微管把染色体和纺锤体连接在一起。在细胞分裂期的后期，分开后的染色单体被拉向两极。染色体移动由两个相互独立且同步进行的过程所介导，分别为过程A和过程B。在过程A中，在连接微管和动粒的马达蛋白的作用下，动粒微管解聚缩短，在动粒处产生的拉力使染色体移向两极。极间微管是从一个中心体伸出的某些微管与从另一个中心体伸出的微管相互作用，阻止了它们的解聚，从而使微管结构相对稳定，两套微管的这种结合形成了有丝分裂纺锤体的基本框架，具有典型的两极形态，产生这些微管的两个中心体称为纺锤极，这些相互作用的微管被称为极间微管。在有丝分裂后期过程B中，极间微管的伸长和相互间的滑行使纺锤极向两极方向移动。星体微管从中心体向周围呈辐射状分布，在有丝分裂后期过程B中，每一纺锤极上向外伸展的星体微管发出向外的力，拉动两个纺锤极向两极方向移动。

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