昆明纺锤体加热台
秋水仙素会使动物细胞染色体加倍吗微管蛋白按照来源可分为植物微管蛋白和动物脑蛋白。因植物微管蛋白难以制备,秋水仙碱与动物脑微管蛋白结合反应研究得要更多一些。秋水仙碱是从植物秋水仙中提纯出的一种生物碱,又名秋水仙素,构成微管的α、β微管蛋白异源二聚体是秋水仙素分子的结合靶点。当秋水仙碱与正在进行有丝分裂的细胞接触时,秋水仙碱结合到微管蛋白的特定位点,导致α微管蛋白与β微管蛋白二聚体结构变形,从而阻断微管蛋白组装成微管,但并不影响微管蛋白的解聚,所以纺锤体会迅速消失。
秋水仙碱的浓度和作用时间对动、植物细胞染色体加倍的影响是关键。有研究结果表明,在花粉母细胞减数分裂细线期与粗线期进行美洲黑杨2n花粉的诱导效果比较好,总体上在减数分裂粗线期进行诱导得到的2n花粉**多,并且诱导的比较好浓度为0.5%。刘爱生等在利用人类外周血淋巴细胞进行染色体G显带制作中,在阻断培养的4h内任意时间加入相应剂量的秋水仙素,能获得用于G显带的形态完好、大小适中、分散均匀、轮廓清楚的中期染色体标本相。陈长超等利用秋水仙碱处理MⅠ期卵母细胞,结果发现Ml期纺锤体发生解聚,染色体周围纺锤体微管全部消失或部分残留,染色体排列异常。 纺锤体在细胞分裂中的精确调控是生物体维持遗传稳定性的关键。昆明纺锤体加热台
如何观察纺锤体呢?
在普通光学显微镜下,人类卵母细胞是半透明的,无法对纺锤体的结构进行观察和分析。传统方法是用一种特异的DNA荧光染料对卵母细胞染色,在紫外光下可显示纺锤体,这种免疫荧光方法对卵母细胞有损伤,不能应用于临床。为了更好的观测纺锤体,美国海洋生物学实验室的R.Oldenbourg等利用纺锤体的双折射特性,开发出偏振光显微镜。现今,偏振光显微镜已经发展成为一种无创性的观察和分析纺锤体动态结构的显微观测系统,我们也叫它纺锤体观测仪。它不仅能对双折射性纺锤体信号的有无进行定性分析,还能对信号的强弱进行定量分析。 核移植纺锤体提高冷冻保存效率纺锤体在细胞分裂过程中与细胞骨架协同工作。
染色体
当细胞从间期进入有丝分裂期,间期细胞微管网络解聚为游离的αβ-微管蛋白二聚体,再重组成纺锤体,介导染色体的运动;分裂末期纺锤体微管解聚,又重组形成细胞质微管网络。
可分为:动粒微管:连接染色体动粒于两极的微管。
极间微管:从两极发出,在纺锤体中部赤道区相互交错的微管。
星体微管:中心体周围呈辐射分布的微管。
染色体的运动依赖纺锤体微管的组装和去组装。在这一过程中动粒微管与动粒之间的滑动主要是依靠结合在动粒部位的驱动蛋白和动力蛋白沿微管的运动来完成。极微管在纺锤体中部交错,有些分布在极微管之间特殊的双极马达蛋白,其中2个马达蛋白沿一条微管运动,另2个马达结构域沿另一条微管运动。由于2条微管分别来自二极,故极性相反。当双极驱动蛋白四聚体沿微管向正极运动时,纺锤体二极间距离延长。反之纺锤体距离缩短。
在生殖医学领域,卵母细胞的冷冻保存技术一直是研究的热点,旨在提高女性生育能力的保存与利用。然而,传统的纺锤体观察方法往往需要对卵母细胞进行固定和染色处理,这不仅破坏了细胞的活性,还限制了对其发育潜能的深入评估。偏光成像技术,特别是Polscope偏振光显微成像系统,通过利用纺锤体微管结构的双折射性,实现了对纺锤体的无损观察。这种技术无需对卵母细胞进行固定和染色,能够在保持细胞活性的同时,实时、动态地观察纺锤体的形态和变化。这不仅提高了观察的准确性和可靠性,还避免了传统染色方法可能带来的细胞损伤和误差。纺锤体微管的数量和分布随细胞分裂阶段而变化。
无需染色纺锤体观察技术能够实时监测冷冻过程中纺锤体的形态变化,从而准确评估冷冻保存的效果。通过对比冷冻前后纺锤体的形态和稳定性,研究者可以优化冷冻保护剂的配方和浓度,以及改进冷冻程序,减少冷冻损伤,提高解冻后卵母细胞的存活率和发育潜能。解冻后的卵母细胞在无需染色的情况下,可以直接通过Polscope系统进行纺锤体观察。这一技术能够迅速评估解冻后卵母细胞的质量,包括纺锤体的形态、位置、稳定性等关键指标,为后续的受精和胚胎发育提供重要参考。在有丝分裂中,纺锤体形成并维持着染色体的稳定性。昆明克隆纺锤体卵冷冻研究
纺锤体微管的排列和稳定性受到细胞骨架的支撑。昆明纺锤体加热台
纺锤体是如何形成的(2)
动粒微管连接染色体动粒与位于两极的中心体。在有丝分裂前期,一旦核被膜解聚,由相反两个方向的中心体伸出的动粒微管就会随机地与染色体上的动粒结合而俘获染色体,微管**终附着在动粒上,动粒微管把染色体和纺锤体连接在一起。在细胞分裂期的后期,分开后的染色单体被拉向两极。染色体移动由两个相互独立且同步进行的过程所介导,分别为过程A和过程B。在过程A中,在连接微管和动粒的马达蛋白的作用下,动粒微管解聚缩短,在动粒处产生的拉力使染色体移向两极。极间微管是从一个中心体伸出的某些微管与从另一个中心体伸出的微管相互作用,阻止了它们的解聚,从而使微管结构相对稳定,两套微管的这种结合形成了有丝分裂纺锤体的基本框架,具有典型的两极形态,产生这些微管的两个中心体称为纺锤极,这些相互作用的微管被称为极间微管。在有丝分裂后期过程B中,极间微管的伸长和相互间的滑行使纺锤极向两极方向移动。星体微管从中心体向周围呈辐射状分布,在有丝分裂后期过程B中,每一纺锤极上向外伸展的星体微管发出向外的力,拉动两个纺锤极向两极方向移动。
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