厦门10X Genomics单细胞测序

样本制备后的保存 为了尽可能地减少转录组的变化，在对细胞进行清洗和计数后，单细胞悬液应当保存于冰上，直至用于后续的上机和文库制备步骤。在理想状况下，一旦制备好样本，应当在3min钟内将其用于下游步骤。然而，您还有必要了解各类细胞的不同性质，因为这可能会影响细胞应在冰上保存的时间，以及它们在制备后多久便应当被尽快使用。例如，有些细胞（如PBMC）如果在冰上放置一段时间，它们就开始形成团块。这些团块很难解离，增加了堵塞的风险，而且每个团块被当成单细胞计数，又降低了细胞计数的准确性。此外，有些细胞更加粘稠，形成团块的速度更快。对于这些细胞，必须尽量减少制备和使用之间的时间差。附加流式分选细胞表面Marker，对于较低分辨率的标志物也能有效鉴定，助力高要求测序项目。厦门10X Genomics单细胞测序

10X Genomics 是一种基于 drop 的微流控技术，液体在配套芯片中的微管道中流动，因此细胞直径会受到芯片中微管道直径的限制，微流体通道的直径约为 50 ~ 60 um，因此捕获细胞的直径不能超过 40um。当细胞直径过大时，容易出现管道堵塞，造成GEM生成失败，对于神经科学研究和心血管疾病研究的老师而言，准备采用单细胞技术用于课题研究的时候，往往会遇到一个尴尬的问题，就是目标细胞，例如神经元细胞、成熟心肌细胞由于体积过大，不适用于 10X 单细胞技术。其中神经元细胞的直径很大，直接超过了芯片中管道的直径，虽然心肌细胞直径低于 50um，但是成熟心肌细胞的长度很长，有可能堵塞通道造成实验失败，这也是为什么现在很多已发表的心脏单细胞文章，主要研究方向是心脏发育的原因了，主要还是因为未发育成熟的心肌细胞比较小，不会出现堵塞管道的风险。因此可以考虑组织解离后过 40um 滤网，过滤掉大细胞，避免出现管道堵塞、实验失败的风险。此种方案的缺点是大细胞被过滤掉，丢失相关细胞数据；另外组织解离获得高质量细胞悬液以后，继续做细胞裂解抽细胞核，开展细胞核测序。具体可访问烈冰官网给我们留言，烈小冰将安排专业技术为您详细解答。青岛二代测序单细胞测序烈冰开展了单细胞转录组、单细胞多组学以及空间转录组等多种产品在内的全套科研解决方案。

单细胞多组学带来的突破 单细胞测序方法不但改进了实验过程，还帮助科学家在健康和疾病研究的关键领域取得新进展。那些过去从转录平均值或单项参数读取中无法获得的新发现正在改变我们对传染病、神经退行性疾病等疾病的认识。从鉴定新的细胞类型和状态，到揭开疾病用药应答和耐药的潜在机制，单细胞测序正在推动突破性的研究，有望改变生物学和医疗。无论是无法解释的疾病，还是人体或自然界中尚未探索的系统，曾经模糊的东西正变得越来越清晰。随着我们迈向科学的未来，我们手头的工具就像伽利略的望远镜一样能够提高焦距和放大倍数，而定义科学未来的知识新深度是十年前的人们所无法想象的。

基于10X Geomics 动态微流控技术，利用Tn5转座酶酶切开放染色质，形成短片段，单细胞ATAC测序在表观基因组学水平上，揭示单细胞染色质的可及性问题，区分细胞异质性，获得开放染色质的位置、转录因子的结合位点、核小体的调控区域和染色质状态等信息，是单细胞表观遗传学的重要突破：分析每个细胞数千个独特的染色质开放区域，识别细胞类型和细胞状态；识别重要的转录因子，进行谱系和发育追踪；探究驱动细胞类型和状态之间基因表达差异的非编码序列；探究细胞类型特异性和基因调控网络特征等。是当前重要的多组学研究基因表达和表观遗传学的手段。全线搭建10X Genomics Chromium Controller单细胞测序平台。

科研的魅力之处，在于无穷尽的探寻生命的本底，通过单细胞测序，我们对组织的分子基础的研究也从初级到深层，并在单细胞层面逐渐达成一致，那么不禁要问一句，组织的空间位置到底重不重要？空间异质性是功能的关键特征，细胞的位置信息更能反应细胞命运调控机制和细胞谱系发生过程。因此时间和空间即像组织的AB面，而不可否认的是，此时空间坐标的记录，像一个还未长大的娃娃，虽未触及分子基础研究的深层，但仍在努力攀登探寻生命本底的下一个高峰。基因测序相关产品和技术已由实验室研究逐渐演变到临床应用，是下一个改变世界的技术。陕西10X Genomics单细胞测序多组学测序

单细胞测序是高通量测序下的又一重大技术突破。厦门10X Genomics单细胞测序

单细胞测序结果动辄上百G数据量，庞大的数据对于分析平台和分析能力有着很高的要求，首先针对下机数据的质控环节：单细胞测序产生数亿的结果序列，不可避免的会出现低质量的测序结果，存在各种情况的序列污染。因此序列过滤及质量评估就会变得极为重要。序列质量主要通过测序质量值Q20/Q30的占比来表征，即碱基测序结果的错误率在1% / 0.1%以下的比例。理想的测序结果reads的碱基质量均高于30。保证数据获得后的处理结果的准确性，为后续细胞类型鉴定和功能分析打下坚实基础。厦门10X Genomics单细胞测序

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