北京单细胞多组学多组学测序

转录组学和蛋白质组学都是获得基因表达情况的重要工具，从生物学角度上看，转录组表示了基因表达的中间状态，可以反映诸如转录调控、转录后调控的机理；而蛋白质是生物体直接的功能执行者，因而对其表达水平的研究有着不可替代的优势。要探究生物体疾病机理、胁迫机制，精确研究重要基因的表达模式和调控机理，只有联合转录组学和蛋白组学表达量数据对生物样本进行系统研究，才能真正观察到mRNA-蛋白质关联性，进而从整体上解释生物学问题。单一的转录本研究不能体现生命进程的变化，因此多组学联合分析成为解析生命进程的有力工具。北京单细胞多组学多组学测序

基因测序是基因检测的方法之一，其又叫基因谱测序，是国际上公认的一种基因检测标准。高通量测序技术是对传统测序一次颠覆性的改变，一次对几十万到几百万条核酸序列进行测定，被称为下一代测序技术(nextgenerationsequencing)，足见其划时代的改变，同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能，所以又被称为深度测序(deepsequencing)。基因测序相关产品和技术已由实验室研究逐渐演变到临床应用，可以说，基因测序技术将是下一个改变世界的技术。苏州scRNA单细胞多组学数据分析烈冰生物首批引进 Chromium X 平台，开启百万级通量单细胞测序新时代。

二代测序技术在测序方法上取得了重大突破，基于“边合成边测序”（sequencingbysynthesis）和大规模平行测序技术（massiveparallelanalysis,MPS），使测序通量和读取速度得到极大提升，烈冰生物斥巨资购置的Novaseq6000测序仪的测序原理可以简化为四步：样品文库构建、簇生成、测序和数据分析。由于读长限制，样品DNA或由RNA逆转录得到的cDNA需要被打断成300-500bp的片段，并在3和5端接上3种序列：1）Index，用于区分样品来源；2）Adapter，用于结合测序通道上的位点；3）Primerbindingsite，用于结合PCR引物启动扩增反应。

BDRhapsody单细胞分选系统集成了荧光显微成像系统，可以对不同荧光标记的细胞进行检测并计数。在进行质量评估之前，首先要将细胞的培养体系更换成上机所需的Buffer。在这个过程中，需要进行多次离心、重悬操作，烈冰Novelbio单细胞实验团队推荐采用水平转子离心机来进行这步操作。这种离心机可以有效减少细胞在多次更换Buffer过程中的损失，尤其是对于细胞量较少的样本来说，显得非常有必要。更换完Buffer之后，还需要将细胞进行过筛操作，去除较大的细胞团，获得较为纯净的单细胞悬液。首先 出现的单细胞多组学方法就是将转录组与其他组学技术结合。

细胞是构成生命的基础单元，迅速发展的单细胞测序技术为在单细胞层面研究细胞功能及其背后的基因调控机制提供了重要的技术手段，单细胞测序可用于检测多种不同的组学种类，包括转录组、染色质开放组、DNA甲基化组、组蛋白修饰组等等，对不同组学技术产生的数据进行整合分析有助于更地刻画细胞内的基因调控状态、揭示调控机制。然而，与传统的bulk数据相比，单细胞数据具有规模大、噪声高、异构性强等特点，如何通过开发新的计算方法实现对这些宝贵数据的有效利用已成为当今生物信息学领域关注的重点与热点。分子检测型单细胞多组学测序技术大多数以转录 组测序为重点。西安BD Rhapsody单细胞多组学测序服务

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分子检测型单细胞多组学测序技术中也有一些集中于探究单细胞内表观遗传组各层面的变化及关联。功能研究型单细胞多组学测序技术,结合了强大的CRISPR基因编辑技术,从而可以深度挖掘基因表达调控与细胞功能以及命运决定之间的因果关系。在未来,为了更系统地研究多层组学之间的互动关系对细胞命运的影响,一方面,单细胞多组学测序技术的策略会继续向转录组结合其他多个组学的三组学甚至四组学方向发展.另一方面,单细胞多组学测序技术会转向研发多组学测序分析和功能验证同时进行的方法,这种探究因果关系的策略对于揭示发育和疾病发展中的关键因子和分子网络模块十分重要。北京单细胞多组学多组学测序

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