常州荧光素D-荧光素钾盐公司

时间:2022年05月21日 来源:

    就可以用高敏感度的CCD相机对动物体内进行***观察而不会伤害到动物本身。在萤光素酶中加入正确的萤光素底物就可以放出荧光,而发出的光子可以被光敏感元件,如萤光探测器或改进后的光学显微镜探测到。这就使得对包括***在内的多种生命活动进程进行观察成为可能。例如,萤光素酶已经被用于商业化的次世代焦磷酸定序技术,借由dNTP接上DNA链时水解放出的焦磷酸,透过另外一个硫酸盐腺甘酸转移酶反应,萤光素酶能将产物ATP与萤光素转化为冷光,机器借此探测光线并定序。萤光素酶也可以被用于检测血库中所存血液中的红血球是否开始破裂。法医可以用含有萤光素酶的溶液来检测犯罪现场中残留的血迹。医院用萤光素酶的发光来发现特定的疾病。萤光素酶还可以作为“报告蛋白”被用于分子生物学研究中,例如,用于在转染过萤光素酶的细胞中检测特定启动子的转录情况或用于探测细胞内的ATP的水平;这一技术被称为报告基因检测法或萤光素酶检测法(LuciferaseAssay)。萤光素酶是一个热敏感蛋白,因此经常被用于研究蛋白热变性过程中热休克蛋白的保护能力。此外,萤光素酶水母素的发光强度与环境中钙离子浓度相关,因此可用于检测生物体内的钙。D-荧光素钾盐检测公司招代理吗?常州荧光素D-荧光素钾盐公司

    具体实验流程:注:该操作流程通常用来检测转染了萤火虫荧光素酶基因的真核细胞中荧光素酶表达的活性,不适用于对细菌荧光素酶进行检测。1.实验***天,消化并接种细胞(根据具体实验选择合适的细胞)于35mm细胞培养皿,置于5%CO2、饱和湿度的37℃培养箱内培养过夜。2.等细胞密度达到70%时用Luciferase报告基因质粒、LacZ的表达质粒及其它质粒(根据具体实验确定)共转染细胞(根据具体实验选择转染方法,如磷酸钙沉淀法、PEI、lipofectamine2000等均可)。3.转染24-36h后,吸取培养液,用预冷的PBS(无钙和镁离子)洗涤细胞。注:荧光酶的酶促反应会被痕量的钙所抑制,故用磷酸钙转染的细胞在收集细胞前应充分洗涤除去含钙介质。4.在每个培养皿中加入350μl预冷的harvestbuffer,于4℃或冰上放置10min裂解细胞。5.在细胞裂解期间,准备足量的ml微量离心管,将ATPbuffer与luciferinbuffer以1:,每管100μl。6.依次取等体积的细胞裂解液(100μl)至步骤5中的离心管中,迅速混匀,在发光仪(Luminometer)上读取吸光值。注:发光反应会迅速衰减,将细胞裂解液加入反应液后5s内必须读取吸光值。7.确保以相同操作手法读取全部样品吸光值后。宿迁荧光素D-荧光素钾盐生物公司D-荧光素钾盐找南京翌科生物科技有限公司怎么样?

    D-荧光素钾盐是一种化学品。中文别名:(S)-4,5-二氢-2-(6-羟基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸钾盐英文别名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxybenzothiazol-2-yl)thiazole-4-carboxylicacidpotassiumsalt产品描述D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,特别是体内活题成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素底物能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的慢病毒转染入细胞后构建稳定表达细胞株,构建原位肿大的瘤模型,之后注入荧光素底物,通过IVIS系统来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或进行药物药效评价等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。注:在抗肿大的瘤药物药效评价试验中,由于生物自发光检测需要根据荧光素表达标定肿大的瘤大小,受肿大的瘤生长所发生的肿大的瘤内部坏死影响,生物自发光并不能很覆盖面广的评价肿大的瘤生长,在抗肿大的瘤药效评价有较高要求的实验中,建议使用小动物核磁成像系统检测肿大的瘤生长。D-荧光素也常用于体外研究。

    其中更有代表性的是一种学名为Photinuspyralis的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有荧光素酶的情况下,萤光素与氧气反应的速率非常慢,而钙离子的存在常常可以进一步加速反应(与肌肉收缩的情况相似)。[1]荧光生成反应通常分为以下两步:萤光素+ATP→萤光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi萤光素化腺苷酸+O2→氧荧光素+AMP+光这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有越10%的能量被转化为光,剩余的能量都变为热能而被浪费。荧光素或荧光素酶不是特定的分子,而是对于所有能够产生荧光的底物和其对应的酶的统称,虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的荧光素酶来催化不同的发光反应。更为人所知的发光生物是萤火虫,而其所采用不同的荧光素酶与其他发光生物如荧光菇(发光类脐菇,Omphalotusolearius)或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中,发光反应所需的氧气是从被称为腹部气管(abdominaltrachea)的管道中输入。一些生物,如叩头虫,含有多种不同的荧光素酶,能够催化同一荧光素底物。做D-荧光素钾盐测试找哪家公司?

    海肾萤光素酶因其底物要求和光输出方面的差异而可用于双重报告检测。Amplite™海肾荧光素酶报告基因测定Amplite™Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒提供了一种快速,灵敏的方法,可以使用专有的发光配方在基于细胞的检测中检海肾萤光素酶的活性,与海肾萤光素酶相互作用后,该试剂产生具有强光的产物。Amplite™海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒特点:该测定法与标准细胞生长培养基兼容该试剂盒可以测量野生型和合成hRluc基因的原始表达或基因表达每个试剂盒均包含可以方便96孔和384孔板检测所必不可少的组分。荧光素酶是生物体内催化荧光素等物质氧化发光的一类酶的总称。自然界中,不同的发光生物拥有不同的荧光素酶,除了萤火虫荧光素酶(FireflyLuciferase)之外,还有发光细菌体内的细菌荧光素酶、发光海星的海星荧光素酶等。目前,人们对萤火虫荧光素酶的研究**多、应用***。一则关于手机上的细菌的新闻里,**在用ATP荧光检测仪检测手机表面的细菌。ATP是一种在动物、植物和细菌等活细胞中都存在的能量物质,由前述的反应式可知,ATP与荧光素、荧光素酶反应发出荧光。检测样品中的微生物越多,ATP就越多,荧光反应的光亮就越大。D-荧光素钾盐测试需要满足哪些条件?连云港荧光素酶D-荧光素钾盐生物公司

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