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    SodiumSalt/D荧光素钠盐分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol纯度：高级纯（）应用：1）体外化学发光分析（invitro）；2）***成像实验（invivo）；3）高灵敏度ATP分析；步骤：Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/体外生物发光检测1）用mL蒸馏水溶解gD-荧光素钠盐，配制成100mM的储存液（200×，浓度30mg/ml）。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。2）用组织培养基1∶200稀释储存液，配置工作液(终浓度150μg/mL)。3）去除培养细胞的培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加1×荧光素工作液，然后进行图像分析。Protocol2：Invivoanalysis/***成像分析1）用无菌的PBS（w/oMg2+、Ca2+）配制D-荧光素钠盐工作液(15mg/mL)，。一旦使用，保持冰冷且避光。D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域，尤其是体内***成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光（见下图）。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化。D-荧光素盐也算是钠盐和钾盐。荧光增白剂ob-1

    荧光素钠[1]，橙红色粉末，无气味，有吸湿性；易溶于水，溶液呈黄红色，并带极强的黄绿色荧光，酸化后消失，中和或碱化后又出现，微溶于乙醇；比较大吸收波长(水)。基本信息药品名称荧光素钠拼音名Yingguangsuna英文名FLUORESCEINSODIUM来源(分子式)与标准本品为9-(邻羧基苯基)-6-羟基-3H-吨-3-酮二钠盐。按干燥品计算，含C20H10Na2O5不得少于。类别诊断用药。剂量滴眼2%溶液贮藏密封保存。制剂荧光素钠注射液2化学性质编辑中文名称：荧光素钠中文别名：荧光黄钠;荧光橙红钠;荧光素二钠英文名称：FluoresceindisodiumsaltCAS号：518-47-8[2]荧光素钠分子式：C20H10Na2O5分子量：等级：BSMDL号：MFCD00167039Beilstein号：3833041EC号：208-253-0荧光素钠[1]3性状描述编辑本品为橙红色粉末；无臭，几乎无味；有引湿性。本品在水中易溶，在乙醇中略溶。橙红色粉末，无气味，有吸湿性；易溶于水，溶液呈黄红色，并带极强的黄绿色荧光，酸化后消失，中和或碱化后又出现，微溶于乙醇；比较大吸收波长(水)。4检查资料编辑氯化物取本品，分取溶液10ml，依法检查（附录ⅧA），与标准氯化钠溶液制成的对照液比较，不得更浓（）。硫酸盐取上述氯化物项下剩余的溶液25ml，依法检查。镇江荧光素钾盐D-荧光素钾盐浓度D-荧光素钾盐测试适用范围包括哪些？

    因此只有在活细胞内才会产生长发生光现象，并且发光光强度与标记细胞的数目线性相关。结构与性能荧光素在氧气、ATP存在的条件下和荧光素酶发生反应，生成氧化荧光素(oxyluciferin)，并产生长发生光现象。荧光素是腹腔注射或尾部静脉注射进入小鼠体内的，约一分钟就可以扩散到小鼠全身。荧光素的半衰期约三个小时，只有活细胞才能够持续表达荧光素酶。(1)荧光素不会影响动物的正常生理功能。(2)荧光素是280道尔顿的小分子，水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透细胞膜和血脑屏障。(3)荧光素在体内扩散速度快，可通过腹腔注射或尾部静脉注射进入动物体内。腹腔注射扩散较慢，持续发光长。荧光素腹腔注射老鼠后约1min后表达荧光素酶的细胞开始发光，10min后强度达到稳定的更高点，在更高点持续约20~30min后开始衰减，约3h后荧光素排除，发光全部消失，更佳检测时间是在注射后15~35min之间；若进行荧光素静脉注射，扩散快，但发光持续时间很短。科研人员根据大量的实验总结出荧光素的合适的用量是150mg/kg，即体重20克的小鼠需要3毫克的荧光素。(4)观察时间的间隔没有更短限制，只要观察的条件控制一致就可以。虽然底物在动物体内有一定的代谢过程。

    其中更有代表性的是一种学名为Photinuspyralis的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中，荧光的产生是来自于萤光素的氧化，有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷（ATP）。没有荧光素酶的情况下，萤光素与氧气反应的速率非常慢，而钙离子的存在常常可以进一步加速反应（与肌肉收缩的情况相似）。[1]荧光生成反应通常分为以下两步：萤光素+ATP→萤光素化腺苷酸（luciferyladenylate）+PPi萤光素化腺苷酸+O2→氧荧光素+AMP+光这一反应非常节省能量，几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯，只有越10%的能量被转化为光，剩余的能量都变为热能而被浪费。荧光素或荧光素酶不是特定的分子，而是对于所有能够产生荧光的底物和其对应的酶的统称，虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的荧光素酶来催化不同的发光反应。更为人所知的发光生物是萤火虫，而其所采用不同的荧光素酶与其他发光生物如荧光菇（发光类脐菇，Omphalotusolearius）或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中，发光反应所需的氧气是从被称为腹部气管（abdominaltrachea）的管道中输入。一些生物，如叩头虫，含有多种不同的荧光素酶，能够催化同一荧光素底物。D-荧光素钾盐长期保存条件是-20℃干燥避光。

    后者能够易溶于水或缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。产品性质运输和保存运输条件：4℃冰袋运输；短期保存：4℃干燥避光长期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期长期保存：有效期一年工作液：先用现配使用方法1.体外生物发光检测1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30mg/mL的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10min，然后进行图像分析。2.***成像分析1）用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液，混匀。2）用µm滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射，以小鼠为例，每只小鼠体重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入体内10-15min（待光信号达到更强稳定平台期）后进行成像分析。注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定更高信号检测时间和信号平台期。 D-荧光素钾盐短期保存条件是4℃干燥避光。无荧光增白剂kh-600

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