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    8．取剩余裂解液测定LacZ的活性，其读数作为内标用以矫正荧光素酶的读数。9.用矫正后的读数作图，分析数据。注：荧光素见光易氧化，已稀释未用的荧光素应丢弃。注意事项：1．荧光素酶检测试剂需在15-25℃条件下预平衡后再进行反应，而后依据具体条件进行自动或手动检测。当用液闪计数仪时，加入荧光素酶检测试剂后立即轻轻混匀。2．如果细胞裂解后不能立即对提取物进行检测，样品可以在冰上保存大约5h，在-70℃可保存数月。不要反复冻融以避免酶活性的降低。3．利用上述方法检测冷的样品时，其信号强度将下降5-15%。4．在荧光素酶活性较高的情况下，导致信号超出线性范围（信号溢出）可用裂解液将样品进行稀释。5．不要储存稀释过的样品。如果必须保存，要在稀释的样品中加入BSA至终浓度为，这样可以保持样品的稳定性。6．一些荧光仪在进行检测前需要1-2s的稳定，因此建议在开机后过一段时间再进行检测操作。荧光素酶报告基因检测主要有哪些用途？a.启动子结构分析，将启动子区域序列（通常2k左右）进行分段截短，或对特定位点进行突变，再分别构建入luciferase报告载体，检测其启动子活性。b.启动子SNP分析，一些基因的启动子区域存在单核苷酸多态性。做D-荧光素钾盐测试真的靠谱吗？宿迁荧光素钾盐D-荧光素钾盐生物公司

    海肾萤光素酶因其底物要求和光输出方面的差异而可用于双重报告检测。Amplite™海肾荧光素酶报告基因测定Amplite™Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒提供了一种快速，灵敏的方法，可以使用专有的发光配方在基于细胞的检测中检海肾萤光素酶的活性，与海肾萤光素酶相互作用后，该试剂产生具有强光的产物。Amplite™海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒特点：该测定法与标准细胞生长培养基兼容该试剂盒可以测量野生型和合成hRluc基因的原始表达或基因表达每个试剂盒均包含可以方便96孔和384孔板检测所必不可少的组分。荧光素酶是生物体内催化荧光素等物质氧化发光的一类酶的总称。自然界中，不同的发光生物拥有不同的荧光素酶，除了萤火虫荧光素酶（FireflyLuciferase）之外，还有发光细菌体内的细菌荧光素酶、发光海星的海星荧光素酶等。目前，人们对萤火虫荧光素酶的研究**多、应用***。一则关于手机上的细菌的新闻里，**在用ATP荧光检测仪检测手机表面的细菌。ATP是一种在动物、植物和细菌等活细胞中都存在的能量物质，由前述的反应式可知，ATP与荧光素、荧光素酶反应发出荧光。检测样品中的微生物越多，ATP就越多，荧光反应的光亮就越大。荧光素钠盐D-荧光素钾盐D-荧光素钾盐母液保存条件是-20℃避光。

    短期保存：4℃干燥避光长期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期长期保存：有效期一年工作液：先用现配使用方法1.体外生物发光检测1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30mg/mL的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。作者：思存链接：zhuanlan./p/来源：知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权，非商业转载请注明出处。高斯荧光素酶近年来，其他荧光素酶（例如高斯荧光素酶）的使用有所增加，因为这些报告基因较小，并且不需要ATP的存在。高斯荧光素酶是一种20kD的蛋白质，可通过氧气催化腔肠素氧化，产生光。来自于海洋足类高斯氏菌的生物发光酶在表达后可有效地从哺乳动物细胞中分泌出来。Amplite™高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒（#AAT-12530）使用专有的发光配方来定量细胞培养基中的荧光素酶活性。当该试剂与高斯荧光素酶相互作用时，产sheng发光产物，该发光产物提供强发光。Amplite高斯荧光素酶报告基因测定试剂盒特点：提供了与HTS液体处理仪器兼容的所有基本组件它们具有高灵敏度。

    或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10min，然后进行图像分析。2.***成像分析1）用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液，混匀。2）用µm滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。4）注射入体内10-15min（待光信号达到更强稳定平台期）后进行成像分析。注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定更高信号检测时间和信号平台期。注意事项1）本品（fireflyluciferin）和甲虫荧光素（beetleluciferin）只只是不同公司在命名上的差异,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid。2）注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定更佳信号平台期和更佳的检测时间。3）如果要进行ATP的检测，尽量避免外源ATP的污染，如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材，在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。南京翌科生物科技有限公司D-荧光素钾盐测试价格。

    而是对于所有能够产生萤光的底物和其对应的酶的统称，虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的萤光素酶来催化不同的发光反应。**为人所知的发光生物是萤火虫，而其所采用不同的萤光素酶与其他发光生物如荧光菇（发光类脐菇，Omphalotusolearius）或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中，发光反应所需的氧气是从被称为腹部气管（abdominaltrachea）的管道中输入。一些生物，如叩头虫，含有多种不同的萤光素酶，能够催化同一萤光素底物，而发出不同颜色的萤光。萤火虫有2000多种，而叩甲总科（包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫）则有更多，因此它们的萤光素酶对于分子系统学研究很有用。如今研究得**透彻的萤光素酶是来自Photinini族萤火虫中的北美萤火虫（Photinuspyralis）。[1]萤光素酶可以在实验室中用基因工程的方法生成，并被用于多种不同的实验。萤光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中。研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成萤光素酶。间接体外成像是一种强大的研究手段，可以对整个动物体中的细胞群落进行分析：将不同类型的细胞（骨髓干细胞、T细胞等）标记上（即表达）萤光素酶。D-荧光素钾盐的使用说明。宿迁荧光素钾盐D-荧光素钾盐生物公司

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    SodiumSalt/D荧光素钠盐分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol纯度：高级纯（）应用：1）体外化学发光分析（invitro）；2）***成像实验（invivo）；3）高灵敏度ATP分析；步骤：Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/体外生物发光检测1）用mL蒸馏水溶解gD-荧光素钠盐，配制成100mM的储存液（200×，浓度30mg/ml）。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。2）用组织培养基1∶200稀释储存液，配置工作液(终浓度150μg/mL)。3）去除培养细胞的培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加1×荧光素工作液，然后进行图像分析。Protocol2：Invivoanalysis/***成像分析1）用无菌的PBS（w/oMg2+、Ca2+）配制D-荧光素钠盐工作液(15mg/mL)，。一旦使用，保持冰冷且避光。D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域，尤其是体内***成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光（见下图）。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化。宿迁荧光素钾盐D-荧光素钾盐生物公司

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