淮安专业做D-荧光素钾盐活题成像原理

    短期保存：4℃干燥避光长期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期长期保存：有效期一年工作液：先用现配使用方法1.体外生物发光检测1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30mg/mL的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。作者：思存链接：zhuanlan./p/来源：知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权，非商业转载请注明出处。高斯荧光素酶近年来，其他荧光素酶（例如高斯荧光素酶）的使用有所增加，因为这些报告基因较小，并且不需要ATP的存在。高斯荧光素酶是一种20kD的蛋白质，可通过氧气催化腔肠素氧化，产生光。来自于海洋足类高斯氏菌的生物发光酶在表达后可有效地从哺乳动物细胞中分泌出来。Amplite™高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒（#AAT-12530）使用专有的发光配方来定量细胞培养基中的荧光素酶活性。当该试剂与高斯荧光素酶相互作用时，产sheng发光产物，该发光产物提供强发光。Amplite高斯荧光素酶报告基因测定试剂盒特点：提供了与HTS液体处理仪器兼容的所有基本组件它们具有高灵敏度。D-荧光素钾盐的配置是什么？淮安专业做D-荧光素钾盐活题成像原理

    后者能够易溶于水或缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。产品性质运输和保存运输条件：4℃冰袋运输；短期保存：4℃干燥避光长期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期长期保存：有效期一年工作液：先用现配使用方法1.体外生物发光检测1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30mg/mL的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10min，然后进行图像分析。2.***成像分析1）用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液，混匀。2）用µm滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射，以小鼠为例，每只小鼠体重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入体内10-15min（待光信号达到更强稳定平台期）后进行成像分析。注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定更高信号检测时间和信号平台期。 徐州荧光素酶编码基因D-荧光素钾盐溶液怎么保存D-荧光素也常用于身体的外部研究。

    SodiumSalt/D荧光素钠盐分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol纯度：高级纯（）应用：1）体外化学发光分析（invitro）；2）***成像实验（invivo）；3）高灵敏度ATP分析；步骤：Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/体外生物发光检测1）用mL蒸馏水溶解gD-荧光素钠盐，配制成100mM的储存液（200×，浓度30mg/ml）。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。2）用组织培养基1∶200稀释储存液，配置工作液(终浓度150μg/mL)。3）去除培养细胞的培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加1×荧光素工作液，然后进行图像分析。Protocol2：Invivoanalysis/***成像分析1）用无菌的PBS（w/oMg2+、Ca2+）配制D-荧光素钠盐工作液(15mg/mL)，。一旦使用，保持冰冷且避光。D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域，尤其是体内***成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光（见下图）。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化。

    5）对于检测灵敏度要求特别高的实验，建议使用新鲜配制的本产品。6）在进行D-荧光素钾盐的溶解时，应使用无钙镁离子的DPBS，因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性，此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响，从而影响检测。7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。8）本产品只作科研用途！荧光素酶(Luciferase)是自然界中能够催化荧光素产生生物发光的酶的统称，其中更有代表性的是来自萤火虫体内(Firefly)和海肾(Renilla)体内的两类萤光素酶，分别命名为F-Luciferase和R-Luciferase，同时近年来研究得较多的来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶（Gaussluciferase）。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)，可通过荧光测定仪设备测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光，常应用于启动子转录活性调控及miRNA靶基因验证等方向研究。萤火虫萤光素酶更通用和更常见的报告基因是北美萤火虫photinuspyralis的荧光素酶，该蛋白质不需要翻译后修饰即可获得酶活性。高浓度（体内）甚至没有毒性，可用于原核和真核细胞。运输和保存运输条件：4℃冰袋运输。做D-荧光素钾盐测试找哪家公司？

    是新型底物开发的一个早期实例。[1]2012NanoLuc®萤光素酶基于定向进化和新型底物开发方面的经验，研究人员从虾的萤光素酶改造设计出一种新型萤光素酶报告基因，即NanoLuc®萤光素酶。这是一种小分子（19kDa）单体酶，具有独特的底物，其灵敏度比已具备高灵敏度的萤火虫或海肾萤光素酶系统高约100倍。这种新型的报告基因有着范围广的应用前景，为进一步的技术开发奠定了基础。[1]2015NanoBRET™技术NanoLuc®的小体积和非常明亮的光输出是作为蛋白质标签的理想特征。这些特征还很适合作为生物发光共振能量转移（BRET）的供体。一项针对各种能量受体荧光基团的深入研究发现，红色光谱中的可选择性有助于消除与BRET测定相关的一些挑战。可将这些荧光基团添加到蛋白质配基等分子中以测量靶蛋白的结合，或与HaloTag®配基耦联以进行活细胞中蛋白质：蛋白质相互作用的检测。[1]2016NanoBiT®技术随着NanoLuc®的诞生，Promega的科学家努力将该报告基因改造为多亚基系统，即“NanoLuc®BinaryTechnology”或NanoBiT®。该系统由两部分组成：11个氨基酸的小标签和一个更大，更精细的NanoLuc®亚基，LgBiT。这两部分结构互补结合。D-荧光素钾盐测试需要哪些必备条件？徐州荧光素酶编码基因D-荧光素钾盐溶液怎么保存

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    附录ⅧB），与标准硫酸钾溶液制成的对照液比较，不得更浓（）。干燥失重取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过%（附录ⅧL）。锌盐取本品，加氯化钠的饱和水溶液10ml溶解后，加稀盐酸2ml，摇匀，滤过，滤液中加亚铁**钾试液1ml，不得发生浑浊。5鉴别方法编辑(1)取本品的水溶液(1→2000)1滴，点于滤纸上，即生成黄色斑点，趁湿置溴蒸气中，1分钟后再使与氨蒸气接触，斑点即变为深粉红色。(2)本品的水溶液显强烈的荧光，用大量的水稀释后仍极明显；但加酸使成酸性后，荧光即消失；再加碱使成碱性，荧光又显出。(3)本品炽灼灰化后显钠盐的鉴别反应（附录Ⅲ）。6含量测定编辑取本品约，精密称定，加水20ml溶解后，加稀盐酸5ml使荧光素析出，用丁醇－氯仿(1:1)提取4次，每次20ml，合并提取液，用水10ml洗涤，洗液再用异丁醇－氯仿(1:1)5ml振摇提取，合并提取液，置105℃恒重的容器中，在水浴上通风蒸发至干，残渣用乙醇10ml溶解后，再置水浴上蒸干，并在105℃干燥至恒重，精密称定，残渣重量与相乘，即得供试量中含有C20H10Na2O5的重量。荧光素钠是一种有机化合物，分子式为C20H10Na2O5，橙红色粉末，无气味，有吸湿性；易溶于水，溶液呈黄红色，并带极强的黄绿色荧光。淮安专业做D-荧光素钾盐活题成像原理

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