D-荧光素钾盐试剂

时间:2022年08月09日 来源:

    LAR)Promega公司推出的第一种萤光素酶检测试剂LuciferaseAssaySystem(LAR),为灵敏、非放射性的报告基因检测拉开了序幕。LAR与萤火虫萤光素酶(luc)报告基因一起,为研究人员开始了解基因表达调控因子提供了首要的工具。[1]1995Dual-Luciferase®报告基因检测系统(DLR)DLR是第一种允许在单个样本中依次检测两个报告基因的试剂。通过允许萤光素酶活性的内部归一化,在提高报告基因检测的可靠性方面取得了关键进展。此外,pGL3报告基因载体系列具有改良后的萤火虫萤光素酶基因,luc+。这个改造一种报告基因以实现性能改进的例子后来被进一步应用到pGL4和luc2报告基因上,通过生物信息学和合成方法,实现了更大的改进。[1]1999ENLITEN®/UltraGlo™重组萤光素酶Promega公司在早期推出的一种重组萤火虫萤光素酶(Enliten)基础上,改造出了一种称为UltraGlo™的热稳定性萤光素酶。UltraGlo™的开发是在各种检测和储藏条件下进行一步法“加样-读数”检测的关键。此后,通过开发新的方法来改变萤火虫萤光素酶检测的信号动力学,例如Bright-Glo™、Steady-Glo®和Dual-Glo®允许使用微孔板进行检测。而“加样-读数”的形式简化了样品处理。D-荧光素钾盐如何选择合作公司?D-荧光素钾盐试剂

    Q:荧光素酶作为报告基因相比于荧光蛋白有哪些优势?Luciferase的灵敏度相比于GFP提高10-100倍以上,同时具有更宽的动态范围,便于数值分析比较,不需要荧光显微镜,而且在***实验中其荧光穿透性高于EGFP等荧光蛋白,同时由于没有内源活性、其本底信号很低。而GFP等荧光蛋白相比于荧光素酶的优势在于可以进行失踪定位,并且其观测不需裂解细胞,方便进行适时观察。Q:海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶相比,相对活性如何?在氧、镁和ATP的存在下,萤火虫荧光素酶作用于甲虫荧光素,而来源于海洋腔肠(Renillareniformis)的荧光素酶在氧的存在下作用于海肾荧光素。双报告基因技术(Dual-reporterassays),结合了萤火虫荧光素酶测试和海肾荧光素酶测试。Q:双荧光素酶报告基因实验转染效率很低而且复孔重复不出来是什么原因?转染效率低的话可以从三个方面改善,首先要确保细胞状态是好的,通常我们选出处于分裂期的细胞,另外阳性对照您可以选择过表达的荧光蛋白质粒,还有就是DNA的质量尤为重要,更好是先酶切验证。这个实验检测结果很灵敏,有一定差异是正常的,通常只要确保它在一个数量级之内即可。如果差异超出这个范围可以从两方面改善,一是记住保持样本的均一性。D-荧光素钾盐试剂D-荧光素钾盐的配置是什么?

    更为人所知的发光生物是萤火虫,而其所采用不同的荧光素酶与其他发光生物如荧光菇(发光类脐菇,Omphalotusolearius)或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中,发光反应所需的氧气是从被称为腹部气管(abdominaltrachea)的管道中输入。一些生物,如叩头虫,含有多种不同的荧光素酶,能够催化同一荧光素底物,而发出不同颜色的荧光。萤火虫有2000多种,而叩甲总科(包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫)则有更多,因此它们的荧光素酶对于分子系统学研究很有用。目前研究得更透彻的荧光素酶是来自Photinini族萤火虫中的北美萤火虫(Photinuspyralis)。免疫荧光法免疫荧光法的基本原理是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体。常用的荧光素有①异硫氰酸荧光素(fluoreceinisothiocyante,FITC),为黄色、橙黄色或褐黄色结晶粉末,有两种异构体,易溶于水和酒精等溶剂。分子量为389,更大吸收光谱为490~495,更大发射光谱为520~530urn,呈现明亮的黄绿色荧光,是更常用的标记抗体的荧光素。②四甲基异氰酸罗达明。

    后者能够易溶于水或缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。产品性质运输和保存运输条件:4℃冰袋运输;短期保存:4℃干燥避光长期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期长期保存:有效期一年工作液:先用现配使用方法1.体外生物发光检测1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成30mg/mL的储存液(100-200×),混匀。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。2)用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3)去除细胞培养基。4)待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,37℃孵育5-10min,然后进行图像分析。2.***成像分析1)用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液,混匀。2)用µm滤膜过滤除菌。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射,以小鼠为例,每只小鼠体重假定20g,每只小鼠用量3mg;4)注射入体内10-15min(待光信号达到更强稳定平台期)后进行成像分析。注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定更高信号检测时间和信号平台期。 南京翌科生物科技有限公司的D-荧光素钾盐测试怎么样?

    请穿实验服并戴一次性手套操作。8)本产品只作科研用途!D-荧光素钾盐是荧光素酶的水溶性底物,存在于多种发光生物体中。在ATP和荧光素酶的催化作用下,D-荧光素钾被氧化,产生蓝绿色的光(560nm),当底物过量时,产生的Chemicalbook光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关。编码荧光素酶的Luc基因是植物、哺乳动物细胞的常用报告基因。由于没有背景干扰,因此可以很容易地检测出低至。用途D-荧光素钾盐是一类在生物体中发现的能引起生物发光的杂环化合物,如萤火虫。在ATP存在下,萤光素酶将其氧化脱羧后会发光。化学研究中可用于荧光素酶的基板。生物活性D-Luciferin是萤火虫荧光素酶的底物。体外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.体内研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS。D-荧光素钾盐荧光素酶和ATP水平分析。扬州D-荧光素钾盐使用说明

D-荧光素钾盐检测的安全性如何保障?D-荧光素钾盐试剂

    随后30年里,Promega不断在萤光素酶实验工具领域推陈出新,保持技术带跑的人的地位。这里提到的萤光素酶即荧光素酶。1991萤光素酶检测系统(LAR)Promega公司推出的7b0a8f9c-3a4b-41a1-a7f8-3萤光素酶检测试剂LuciferaseAssaySystem(LAR),为灵敏、非放射性的报告基因检测拉开了序幕。LAR与萤火虫萤光素酶(luc)报告基因一起,为研究人员开始了解基因表达调控因子提供了首要的工具。1995Dual-Luciferase®报告基因检测系统(DLR)DLR是7b0a8f9c-3a4b-41a1-a7f8-3允许在单个样本中依次检测两个报告基因的试剂。通过允许萤光素酶活性的内部归一化,在提高报告基因检测的可靠性方面取得了关键进展。此外,pGL3报告基因载体系列具有改良后的萤火虫萤光素酶基因,luc+。这个改造一种报告基因以实现性能改进的例子后来被进一步应用到pGL4和luc2报告基因上,通过生物信息学和合成方法,实现了更大的改进。[1]1999ENLITEN®/UltraGlo™重组萤光素酶Promega公司在早期推出的一种重组萤火虫萤光素酶(Enliten)基础上,改造出了一种称为UltraGlo™的热稳定性萤光素酶。UltraGlo™的开发是在各种检测和储藏条件下进行一步法“加样-读数”检测的关键。此后。D-荧光素钾盐试剂

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