镇江荧光素酶编码基因D-荧光素钾盐溶液怎么保存

    可用荧光素酶检测系统灵敏方便地测定荧光素酶基因的表达。荧光素酶报告基因有许多优点：①非放射性；②比CAT及其他报告基因速度快；③比CAT灵敏100倍；④荧光素酶在哺乳细胞中的半衰期为3小时，在植物中的半衰期为3．5小时。由于半衰期短，故启动子的改变会即时导致荧光素酶活性的改变，而荧光素酶不会积累。相反，CAT在哺乳细胞中的半衰期为50小时。荧光素酶浓度在10—16mol/L（10pS/L）到10-8mol/L（1mg/L）范围内，荧光信号强度与酶浓度成正比。在理想条件下，可检测到l0-20mol/L的荧光素酶。检测步骤：1．用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。2．设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。3．筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。4．扩增转录因子质粒，提纯备用。同时准备相应的空载质粒对照，提纯备用。5．培养293（或其它目的细胞），并接种于24孔板中，生长10-24小时（80%汇合度）。6．将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞。7．提取蛋白并用于荧光素酶检测。8．加入底物，测定荧光素酶的活性。9．计算相对荧光强度，并与空载对照比较。做D-荧光素钾盐测试价格是多少。镇江荧光素酶编码基因D-荧光素钾盐溶液怎么保存

    荧光素酶(Luciferase)是自然界中能够催化荧光素产生生物发光的酶的统称，其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是来自萤火虫体内(Firefly)和海肾(Renilla)体内的两类萤光素酶，分别命名为F-Luciferase和R-Luciferase，同时近年来研究得较多的来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶（Gaussluciferase）。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)，可通过荧光测定仪设备测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光，常应用于启动子转录活性调控及miRNA靶基因验证等方向研究。萤火虫萤光素酶**通用和**常见的报告基因是北美萤火虫photinuspyralis的荧光素酶，该蛋白质不需要翻译后修饰即可获得酶活性。高浓度（体内）甚至没有毒性，可用于原核和真核细胞。Amplite™萤光素酶报告基因检测试剂盒（12518）使用无DTT**配方来定量活细胞和细胞提取物中的萤光素酶活性。该测定基于萤火虫荧光素酶，萤火虫荧光素酶是一种单体的61kD酶，可催化荧光素的两步氧化，在560nm处产生光。Amplite™萤光素酶报告基因检测试剂盒特点：具有优化的“混合读取”测定规程，可与HTS液体处理仪器兼容具有高灵敏度。盐城萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐供应商D-荧光素钾盐荧光素酶和ATP水平分析。

    每孔加入100μl养24h后，Luciferin使其终浓度为150μg/ml，PBS，再加入D-立即用活题成像系统检测，分析发光强度与细胞数之间的相关性。4)细胞生长曲线绘制MCF7-luc细胞和作为对照取表达荧光素酶的MCF-7细胞，接种于24孔板，接种密度为2×104/孔。细胞接种后1～7d，每天胰蛋白酶消化其中3孔细胞，用细胞计数仪测定细胞数。以细胞生长天数为横坐标，细胞数目为纵坐标，分别绘制两种细胞生长曲线。二．动物模型BLAB/c裸鼠皮下移植瘤模型的建立BLAB/cnu/nu裸鼠，4～5周龄，体重（15±2）g，雌雄各3只。取对数生长期的MCF-7用PBS重悬为2．5×10/ml悬液，每只裸鼠左右背侧近腋部皮下接种100μl，共接种6只。接种后第5d采用德国BERTHOLD公司的活题成像系统检测信号强度。以后每5d观测一连续观测30d。观测前每只裸鼠戊巴比妥钠麻醉（计量为：35mg/kg体重），按150mg/kg体重的量腹腔注射luciferin（invivograde），10min后，进行活题成像观察皮下肿大的瘤的生长情况，定量分析各时间点的荧光值。绘制肿大的瘤皮下生长曲线.MCF-7-luc细胞裸鼠皮下移植瘤的病理形态学观察MCF-7-luc细胞裸鼠皮下接种后25d，脱颈处死小鼠，取肿大的瘤组织，制成石蜡切片，切片厚度为3μm。

    但是上一次底物的残留曲线可以知道，可以控制对下一次观察结果的影响。储存与运输一般放在-20℃的冰箱即可，半年以上不使用放在-80℃的冰箱，溶解配制后放在4℃冰箱，短期运输放在4℃环境。建议现用现配，D荧光素钾盐在液体中容易降解。应用领域肿大的瘤，干细胞，药物开发，基因治的好，转基因小鼠，免疫学等等。英文名字firefly.中文名称荧光素酶，重组荧光素货号AAT-12500规格￥1430/1mL背景资料：荧光素酶是来自北美萤火虫（Photinuspyralis）中荧光素酶基因的克隆和重组表达，它为实验研究或者用生物荧光试剂制备试剂盒检测ATP或者荧光素底物提供了可信度和可靠性。这种重组酶可以克服由天然资源纯化获得荧光素酶时受季节和地方区域变化的影响。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)，可通过荧光测定仪设备测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光，常应用于启动子转录活性调控及miRNA靶基因验证等方向研究。产品形式提供的荧光素酶*重组荧光素*产品为溶液形式。作者：思存链接：zhuanlan./p/来源：知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权，非商业转载请注明出处。ATP作用下的D-荧光素钾盐什么样。

    酸化后消失，中和或碱化后又出现，微溶于乙醇；比较大吸收波长（水）。中文名称：荧光素钠中文别名：荧光黄钠；荧光橙红钠；荧光素二钠英文名FLUORESCEINSODIUM等级：BS物性数据编辑播报1.性状：未确定2.密度（g/cm3,25/4℃）：.相对蒸汽密度（g/cm3,空气=1）：未确定4.熔点（ºC）：3205.沸点（ºC,常压）：未确定6.沸点（ºC,8kPa）：未确定7.折射率：未确定8.闪点（ºC）：未确定9.比旋光度（º）：未确定10.自燃点或引燃温度（ºC）：未确定11.蒸气压（kPa,25ºC）：未确定12.饱和蒸气压（kPa,60ºC）：未确定13.燃烧热（KJ/mol）：未确定14.临界温度（ºC）：未确定15.临界压力（KPa）：未确定16.油水（辛醇/水）分配系数的对数值：未确定17.上限（%,V/V）：未确定18.下限（%,V/V）：未确定19.溶解性：溶于水及乙醇，带有强的绿色荧光，水溶性好。南京靠谱的D-荧光素钾盐测试公司。x荧光硫含量标准物质

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