南京本地脑梗MCAO模型注意事项
采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价,0分:无神经功能缺损症状;1分:出现左侧 Honer征,轻度神经功能缺损;2分:提尾对侧前肢内旋,肩内收,中度神经功能缺损;3分:向对侧转圈、向对侧倾倒,重度神经功能缺损;4分:不能自发行走,部分意识丧失。鼠侧倾倒,评分为3分。 沿脑桥上界面切断,去除嗅球,称全脑重,立即放入-20℃冰箱, 20 min 后取出,由前向后做连续冠状切片(切片厚度2 mm)。将脑切片置入0.1% TTC溶液中,后放入恒温振荡器中,37℃避光染色30 min,将脑切片取出后放入固定液中固定 24 h,取出脑片,相机拍照,用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。小鼠缺血性脑梗死模型也为神经康复研究提供了有力支持。南京本地脑梗MCAO模型注意事项
造模方法 颈部备皮常规消毒,取颈正中切口剪开皮肤,分离皮肤下软组织并暴露颈动脉鞘; 游离出颈总动脉1.5cm,穿线备用; 向远心端找到颈外侧动脉,游离涌现结扎,提起颈总备用线,在近心端,远心端用动脉夹夹住; 在近心端动脉夹处,用5mL注射器针头刺破血管,稍微提起动脉夹,用镊子夹住线栓,从小口插入动脉后,去掉远心端动脉夹,然后用镊子夹住线栓,线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm; 用备用线将颈总和线栓一起结扎住,*好是结扎双道,记录线栓插入时间,在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住,去掉动脉夹; 注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。 线栓法是国内外*常用的制作脑局部缺血再灌注损伤的方法。Koizumi 于 1986 年首先报道了用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,此后 Longa等对该方法进行了改良。线栓法脑缺血模型的研究已经取得很多突破和进展,但模型制备的稳定性受很多因素的影响,如小鼠体质量、线栓的选择等。小鼠缺血再灌注损伤后脑梗死体积百分比的变化可以为研究治*脑卒中药物时间窗提供基础依据,对进一步深入研究大鼠缺血再灌注损伤模型有重要的意义。国内脑梗MCAO模型注意事项手术有一定技术难度,血管结扎不紧或结扎线脱落,会出血导致病理生理状态改变或增加死亡。
TTC染色如何测定脑梗MCAO面积-TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。将模型动物大鼠安乐死,解剖取材完整的脑组织,在-20℃速冻20min,便于切片。切片切成6片,每隔2mm切一片。将切片至于2%TTC磷酸缓冲液(PH 7.4)溶液中,用锡箔纸盖住培养皿,放入37℃温箱30min,15min后翻动脑切片,使其均匀接触到染液。
脑卒中具有发病率高、病死率高、残疾率高及复发率高的特点。其中缺血性脑卒中的发病率高于出血性脑卒中,占脑卒中总数的 60% ~ 70%。缺血性脑卒中引起的组织损伤是主要的致死原因,但研究发现,缺血后再灌注引起的过量氧自由基是造成组织损伤的主要因素。 通过制备脑局部缺血再灌注损伤动物模型研究脑缺血再灌注损伤的作用机制已成为国内外的研究热点。线栓法是*常用的脑局部缺血再灌注损伤模型制备方法,此方法不需要开颅且不需要呼吸机等仪器辅助,缺血部位较恒定,能够准确控制缺血及再灌注时间,容易控制局部条件,全身影响小,是制作脑局部缺血再灌注损伤模型*理想的方法。实验外包团队他们可以帮助科研人员制定实验方案、优化实验流程、提高实验效率等。
在实验过程中,动物的表现会被详细记录。例如,它们是否能保持平衡,是否出现跌倒,以及跌倒的频率和持续时间等。这些数据将被用于分析脑梗对动物平衡和协调性的影响。 这种实验方法有助于我们深入理解脑梗对神经系统的影响,以及可能对治*方法和康复策略的改进提供重要信息。例如,如果发现脑梗后的动物在转棒实验中的表现明显下降,这可能表明脑梗影响了动物的平衡和协调能力。这可能会引导研究人员寻找新的治*方法,以改善或恢复这些功能。中风的高发病率、残疾率和死亡率给家庭和社会带来了沉重的负担。北京脑梗MCAO模型多少钱
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进一步研究小鼠缺血性脑梗死模型,科学家们可以深入了解脑梗死的发病机制、病理生理过程以及神经功能损害。通过不断优化实验方法和技术,研究人员可以更精确地模拟人类缺血性脑梗死的临床表现,为临床治*提供有力的实验依据。 在研究过程中,科学家们发现了一些有益的发现。例如,他们发现某些中药成分和天然产物具有显*的抗缺血作用,这些发现为开发新型抗缺血药物提供了新的方向。此外,研究者还发现了一些神经保护因子,这些因子在缺血性脑梗死发生后可以减轻神经细胞的损伤,为治*脑梗死提供了新的思路。南京本地脑梗MCAO模型注意事项
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