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时间:2022年02月19日 来源:

经验总结及分享: 

CCK8的说明书大家一定要认真阅读,里面很多细节的问题都有提到。而且说明书里提供的一些关于各种细胞的种板数都很有参考价值,因为那是反复验证过的比较好数值。但无论如何,做这个试验一定要摸条件。你就算再懒,这个懒不得,否则你都只是在做无用功。以下言论全部以细胞毒性试验为前提, 如果你做的是促进细胞生长的***的药效实验那就另当别论了。

摸条件包括1、种板数;2、种板后细胞的贴壁生长时间;3、加药后的孵育时间;4、cck8试剂加入量;5、cck8试剂加入后细胞孵育时间。看起来很多,其实这就是一个实验。而且都是种的空白板,也就是不加***,只加细胞和CCK8。 若细胞培养时间较长,培养基颜色或 pH 发生变化,建议更换培养基后再加 CCK-8.上海cck8 od

cck8试剂加入后孵育时间,随着时间的增加,OD值就会增大。总之原则就是把OD值控制在1.0左右。这里我考察了0.5h、1.0h、2.0h。再说一下关于种板设置问题。众所周知周围一圈孔因为边缘效应都是不用来做实验的。一般每组样品我会设置6个复孔,得到的OD值去掉**大值与**小值,其余取平均值。我用的是排***,会省很多力气,但是也会增大组内误差。这个只有通过校正移液***和选用**适***头了。能力有限,表达不清的大家凑合着看看吧。有疑问的欢迎大家留言讨论,我们的目标是共同进步江苏mtt cck8MTT与CCK8比色法的实验细节和注意事项.

CCK8检测细胞增殖/毒性的注意事项:1.加入CCK8溶液时不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数;2.要设计空白对照组;3.对于大多数情况,加入CCK8溶液后,孵育2h左右就可以了;4.使用酶标仪之前要提前开启10min预热;5.若连续多天检测,必须保持所有条件一致。相关链接:CCK8的特性、保存方法以及与BrdU的区别CCK8空白对照,测定参比波长的设定以及OD值的合适范围CCK8标准曲线、检测时间、终止反应以及减少加样误差的方法外界因素(金属/***/细菌/培养基/培养板)对CCK8测定的影响细胞因素(预培养/生长方式/状态/细胞数/死细胞)对CCK8测定的影响细胞增殖到底用MTT还是CCK8呢?

细胞增殖实验就是对细胞生长的测定,常用的方法有MTT、CCK8以及流式检测。阅读大量文献发现,如果想证明一个***或者说是一个作用条件对细胞生长的影响,基本上大家都采用MTT或CCK8结合流式的双标准来证明作用效果。所以,***先给大家介绍一下MTT和CCK8比色法的实验操作和注意事项。MTT实验操作1、在96孔板中培养细胞,设置对照组(细胞+无血清培养基)、实验组和空白组(无血清培养基),可以采用如下图的排版方式:2、在对照组和实验组中,CCK8系列简称终于来了.

再此,给大家分享个小事情,有次,因为实验时间点已经到,但是盒子不够,我们就用了某天的CCK-8试剂盒,***出来的结果如图3。这个结果是我所不能接受的。后来用Sigma的再重复了一次,如图4,这种有深有浅的才是该有的结果。我想说的是在有能力选择范围内,尽量选择好一点的试剂,免得浪费时间。后来博士换了导师,换了课题,没有再用Sigma的了,用了一个日本的牌子,名字和货号如下,结果只能说justsoso,肯定没有Sigma的好用。二次CCK8检测细胞增殖和毒性实验.浙江碧云天 cck8

CCK8虽好,这些情况下不建议用!上海cck8 od

CCK法的操作步骤(更多内容请见说明书):实验一:细胞活性检测1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(37℃,5%CO2)。2、向每孔加入10μLCCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。5、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。上海cck8 od

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