浙江测完cck8的细胞能去染色吗

时间:2022年01月24日 来源:

制作标准曲线1.先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。2.按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。3.接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定O.D值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),O.D值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提条件是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间)。在电子耦合试剂(也就是细胞是活的,有呼吸,有能量代谢).浙江测完cck8的细胞能去染色吗

实验材料及试剂

96 孔板、CO2培养箱、酒精灯、移液***、酶标仪等;细胞、CCK8等。

实验内容取生长状态良好的对数生长期细胞,每孔按 4×103个接种至 96 孔板中,每组设置8个复孔,置于细胞培养箱中培养,待细胞贴壁后转染相应质粒后。继续培养 48h 后,弃含药培养基,每孔加入新鲜配制的含 10uL的毒性检测液CCK8,置于培养箱中继续培养 4h 后,用酶标仪测波长为450 nm的OD值。实验重复 3 次, 取实验结果的平均值作为**终实验结果。按公式计算生长***率=[(对照组 OD-实验组 OD)/对照组 OD]  ×**,以分组为横坐标,生长***率为纵坐标,绘制细胞生长***率柱状图。 江苏cck8测毒性实验时间过长会怎样各有千秋!CCK8之外的选择除了MTT,还可以是LDH.

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CCK-8盒子的选购还记得***次做CCK-8的实验时研究生二年级的时候,当时用的***个盒子是Sigma的,当时的Sigma-Aldrich就是Sigma-Aldrich,还不是现在的Millipore-Sigma。那个盒子给了我莫大的鼓励,因为在那之前做分子克隆一直都不是很顺利。这个盒子是我的硕士老板从美国带回来的,品质有保证,***的结果也是很好的。后面在做CCK-8的实验时,我们在有选择的情况下都会买sigma,下图2是sigma官网的截图。其实也不贵,只是到货时间太慢。细胞增殖检测——CCK8.

CCK8检测细胞增殖/毒性的方法:

1.将处于对数生长期的各实验组细胞胰酶消化后,完全培养基重悬成细胞悬液,并计数。

2.根据细胞生长快慢决定铺板细胞密度(多数为1000-2000 cell/well),每组3-5重复,每孔100-200μl培养基。根据实验设计决定铺板数量(如需要检测5天,则铺5张96孔板),我们以1000 cell/well,5复孔,200μl培养基,检测5天为例,各实验组需要细胞数量为1000×5×5个细胞,从计数好的细胞悬液中取出所需的细胞量和完全培养基混匀,**终体积为200×5×5μl。 使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂.上海cck8是什么

CCK8细胞增殖实验检测原理.浙江测完cck8的细胞能去染色吗

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