TNFRSF25

时间:2022年07月26日 来源:

LUMINEX常见问题及解答(二)6)客户自己提供抗体,是否可以进行LUMINEX检测?Luminex和ELISA检测试剂都需要两个配套的特异性抗体。我们公司具有开发Luminex试剂盒的经验。但是,需要一系列的开发工作才能保证结果的特异性、重复性和可靠性。7)除了蛋白,LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测?可以用于基因表达,基因多态性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX数据表达水平差异有无意义?表达差异主要取决于标本的性质和数量,我们公司为客户提供专业的数据统计服务。9)LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术,检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大,是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子,而且检测速度较慢,不适合高通量分析。由此可见,两种方法应用方向有很大差别。LabEx多因子检测作为高效的检测手段,被广泛应用在多种疾病研究中。TNFRSF25

产生组织切片非特异性染色的原因有哪些?如何解决?1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色,建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高(含血细胞多的组织),需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色;4)、非特异性组分与抗体结合,这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果;5)、DAB孵育时间过长或浓度过高;6)、PBS冲洗不充分,残留抗体结果增强着色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要;7)、标本染色过程中经常出现干片,这容易增强非特异性着色。MAdCAM-1细胞因子检测是一个强大的工具,通过定制识别产生积极反应的细胞因子的独特组合。

酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。基本原理:它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于订量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可以用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单,方便迅速,特异性强。

Luminex液相悬浮芯片利用梯度稀释的标准品检测信号,构建标准曲线,还可对96孔微孔板中的样品的多种细胞因子进行同步相对定量。Luminex液相悬浮芯片的技术优势远超传统ELISA,特别适合大批量样本中多个特定因子的定量检测。由于Luminex悬浮芯片的规格是1张芯片可以检测多达78例样本,许多研究人员在日常实验研究(例如动物实验、细胞实验)中往往只有十几例到几十例不等的样品需要检测,用整张Luminex芯片就存在浪费情况。为帮助广大研究人员在样本数量较少的时候也能够享受Luminex芯片技术带来高质量数据及便利。LabEx推荐出使用频率和稳定性均靠前的Luminex芯片开展全国研究人员“拼板”业务。每张芯片多可检测80例样本,参与拼板的项目10例起拼,拼板成功立即启动实验,两周内即出报告!LabEx可以提供包括MSD、Luminex、CBA以及抗体芯片在内的多因子检测服务。

1)除了蛋白,LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测?可以用于基因表达,基因多态性和HLA配型分析。2)如何判定LUMINEX数据表达水平差异有无意义?表达差异主要取决于标本的性质和数量,我们公司为客户提供专业的数据统计服务。3)LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术,检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大,是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子,而且检测速度较慢,不适合高通量分析。由此可见,两种方法应用方向有很大差别。4)如何控制LUMINEX检测的质量?我们对每一次检测都设定标准曲线,并设定内参进行校正。我们会定期做仪器校正,检测精密度和重复性实验以确保检测结果的可靠性。LabEx提供抗体蛋白质芯片,sengenics服务!Endoglin

细胞因子的检测常常被用作各项疾病中预测免疫反应强度的生物标志物。TNFRSF25

液态流式技术(Luminex)特点:多重检测:理论上可同时检测100种生物靶标。节省样品:只需低至25μl的样品体积。高灵敏度:精确定量下限低至0.1pg/mL。应用范围应用领域:免疫、炎症、心血管疾病、肿块物研究、肾、代谢、神经、细胞间作用。分析物类型:细胞因子、炎症因子、趋化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、肿块物标记物、基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶抑制剂。其他应用:信号通路、重大疾病相关、Biomarker开发、临床应用。TNFRSF25

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