福建分子荧光寿命成像使用方法

荧光寿命是指分子受到光脉冲激发后返回基态之前在激发平均停留的时间，处于激发态的荧光分子在从激发到基态的过程中发射荧光释放能量。荧光寿命取决于荧光分子所处的微环境，通过对样品荧光寿命的测量和成像可以定量获取样品的功能信息。荧光寿命成像技术有两种：时间域和频率域。（1）时域FLIM：需要脉冲光源，所以一般在双光子的系统上比较常见FLIM（荧光寿命成像Fluorescence Life-time imaging Microcopy简称FLIM）。（2）频域FLIM：需要一个相位调制的光源，有用LED调制的， FLIM对很多研究都有帮助，以下为荧光寿命成像FLIM的应用：1）细胞体自身荧光寿命分析；2）自身荧光相对荧光标记的有效区分；3）具有相同频谱性质的不同荧光标记的区分；4）活细胞内水介质的PH值测量；5）局部氧气浓度测量；6）活细胞内钙浓度测量；7）时间分辨Forster共振能量转移（FRET）：纳米级尺度上的远程测量，环境敏感的FRET探针定量测量。荧光成像在疾病诊断，药物分布和代谢评估以及血管生物成像中得到了普遍的应用。福建分子荧光寿命成像使用方法

荧光寿命成像和生物发光的不同之处：产生光子的原理不同，类似于我们都是通过肉眼去观察萤火虫和发光水母一样，生物发光与荧光成像在本质上，都是机体中特定的细胞或材料发出光子，被高灵敏度的CCD检测到形成图像，但是生物发光与荧光寿命成像产生光子的过程和机制是完全不同的。生物发光与荧光成像相同点：都需要对细胞进行标记。生物发光产生的光子和荧光寿命成像产生的光子都可以被高灵敏的CCD检测并形成图像，就像一个人的眼睛就可以既看到萤火虫又可以看到发光水母一样。荧光寿命(FLT)是荧光团在发射光子并返回基态之前花费在激发态的时间。根据荧光基团的不同，FLT可以从皮秒到数百纳秒不等。广东化学荧光寿命成像报价荧光寿命不受荧光探针的浓度的影响，可排除纳米材料的胞吐分化导致的纳米颗粒的稀释等对测量的影响。

用于流场诊断的快速荧光寿命成像系统及方法：荧光寿命成像具有不受染料浓度、不受光漂白、不受样本厚度和光源噪声的影响等诸多优点，通过这一技术手段可以深入地进行功能性测量，获取分子构象、分子微环境变化等信息，研究分子间的相互作用。荧光共振能量转移是一种非辐射的，距离依赖的由供体荧光基团传递能量至受体荧光基团的过程，普遍用于蛋白质的空间构象变化，蛋白质分子间的相互作用，分子间距离的测量等研究。荧光寿命是荧光分子停留在激发态的时间，是荧光分子的固有性质，同荧光强度成像相比。

荧光寿命成像在生命科学研究中的应用：自发荧光FLIM被普遍应用于非标记生物成像领域。所谓自发荧光，即生物细胞本身便包含荧光分子，称为内源性荧光分子团。FLIM通过对自发荧光分子团（如NAD(P)H）荧光寿命的考察，可以实现细胞代谢的监测。这种方案无需人为对样品加入荧光试剂便可以发射荧光，有效减少了荧光染料对样品的毒性、荧光分子与样品的非特异性结合及染料对生理性能的干扰影响。外源分子探针FLIM借助于外部荧光染料的注入以产生荧光。如今，为了利用FLIM对物理条件（包括粘度、温度、酸度和氧化作用）的敏感性，已经开发出了许多适用于体内和体外应用的光学探针。荧光寿命成像可以直接检测荧光和时间分辨的荧光寿命。

荧光寿命成像显微术是一种利用荧光染料固有特性的成像技术。除了具有特有的发射光谱外，每个荧光分子还有特有的寿命，它反映了荧光基团在发射光子之前处于激发态的时间。除了标准的荧光强度测量外，寿命分析还可以提供其他信息。提高质量，荧光寿命成像提供了额外的信息，有助提高共聚焦成像的质量。 它非常适合用于区分荧光发射光谱重叠的荧光探针，或消除不需要的背景荧光信号。功能成像，FLIM 是一种用于测量和量化成像数据的重要应用。 由于寿命信息与荧光基团浓度无关，因此它非常适合用于功能成像。功能成像超越了传统的分子样本位置和浓度记录，通过该技术可以进一步研究分子功能、相互作用及其环境。荧光寿命成像具高灵敏度、可检测人体生物样品等优点。浙江三维荧光寿命成像采购

荧光寿命成像可以定量的区分参与FRET和没有参与FRET的分子数量。福建分子荧光寿命成像使用方法

荧光寿命显微成像技术（FLIM）具有对生物大分子结构、动力学信息和分子环境等进行高分辨高精度测量的能力，因此其重要性日渐提升，被普遍地应用于生物学研究及临床诊断等领域。荧光寿命成像的发展很好地弥补了基于强度成像的问题，对生物医学检测有着重要的意义。荧光的特性包含有：荧光激发和发射光谱、荧光强度、量子效率、荧光寿命等,其中，荧光寿命是指荧光分子在激发态上存在的平均时间（纳秒量级）。分子的荧光寿命在几纳秒至几百纳秒之间，因此，测量荧光寿命需要极快响应时间的探测器。福建分子荧光寿命成像使用方法

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