北京动物荧光寿命成像使用步骤

时间:2023年03月15日 来源:

荧光寿命成像在生命科学研究中的应用:自发荧光FLIM被普遍应用于非标记生物成像领域。所谓自发荧光,即生物细胞本身便包含荧光分子,称为内源性荧光分子团。FLIM通过对自发荧光分子团(如NAD(P)H)荧光寿命的考察,可以实现细胞代谢的监测。这种方案无需人为对样品加入荧光试剂便可以发射荧光,有效减少了荧光染料对样品的毒性、荧光分子与样品的非特异性结合及染料对生理性能的干扰影响。外源分子探针FLIM借助于外部荧光染料的注入以产生荧光。如今,为了利用FLIM对物理条件(包括粘度、温度、酸度和氧化作用)的敏感性,已经开发出了许多适用于体内和体外应用的光学探针。荧光寿命成像中的荧光寿命是什么意思?北京动物荧光寿命成像使用步骤

荧光寿命通常来讲是一定的,不受激发光强度、荧光团浓度等因素的影响,只与荧光团所处的微环境有关,因此,利用荧光寿命显微镜(Fluorescence lifetime imaging microscopy, FLIM)对样品进行荧光寿命成像,可以对样品所在的微环境中的许多物理参数如氧压、溶液疏水性等及生物化学参数如pH值、离子浓度等进行定量测量。此外,荧光寿命成像技术还可以同时获得分子状态和空间分布的信息。因此,荧光寿命成像在生物医学领域有广阔的应用前景。广州单分子荧光寿命成像批发光寿命成像显微技术已在生命科学领域中得到了普遍的应用。

荧光寿命成像和荧光光盘有什么区别?与荧光光谱一样,荧光寿命也是荧光物质的一种内在特有性质,不受荧光物质浓度、激发光强度等因素的影响。荧光寿命成像能在不受荧光强度影响因素影响的条件下,在纳米分辨率水平对蛋白互作进行研究,或者通过 FRET 探针研究分子环境变化,更重要的是其测量数据准确性高、易重复。通过荧光寿命成像还可以对样本所处的微环境进行检测、对样品组份进行分离等等。在传统的荧光强度和荧光光谱两个维度的基础上,又增加了荧光寿命这一新的成像维度,大幅度拓展了该系统的应用范围。

荧光寿命成像可以运用在哪些地方?荧光寿命成像显微技术已在生命科学领域中得到了普遍的应用。成像,扩散光学层析成像,荧光相关光谱等等。使用我们专有的多维时间相关单光子计数技术(TCSPC),我们的FLIM和TCSPC系统具有超高光子效率的特点。因此,科学家,医生,研究人员和其他用户能够进行TCSPC FLIM显微镜检查,多波长FLIM,同时FLIM和快速获取FLIM。生命科学是我们荧光寿命成像显微(FLIM)设备的主要应用领域。经常用于以下领域:分子影像学、代谢成像、FRET成像、同时进行NAD(P)H和pO2成像。荧光寿命成像特别适用于新材料、光子学、光伏、光催化、生物材料的原理探究和设计优化。

荧光成像技术涉及精确测量已添加到组织中的自然荧光分子或荧光标签的荧光衰减率或寿命。由于寿命取决于分子环境的特性,如温度和pH,以及其与周围分子的相互作用,因此可利用荧光成像技术获得有关分子性质及其微环境的信息。通常,使用激光扫描共聚焦显微镜进行荧光成像技术,通过扫描激光束穿过荧光样品以形成图像,从而实现高分辨率。为了在宏观尺度上获得荧光成像的信息,研究人员开发了一种共焦的宏观系统,该系统结合了激光和非常短的脉冲,利用只有皮秒的长度和非常灵敏的检测器来检测荧光。该系统还包括计算光子的电子器件,并绘制它们相对于激光脉冲和样品上激光束位置的时间分布。为什么说荧光寿命成像FLIM相比于荧光强度成像更有优势?江苏荧光寿命成像研发

荧光寿命成像主要可以用于样品分离。北京动物荧光寿命成像使用步骤

分子的荧光寿命在几纳秒至几百纳秒之间,因此,测量荧光寿命成像需要极快响应时间的探测器。如今主要存在两类方案:一是时域测量,由一束窄脉冲将荧光分子激发至较高能态S1,接着测量荧光的发射几率随时间的变化。典型的时域测量方法有TCSPC和时间门(TG)两种。TCSPC利用快速秒表测量激发脉冲与探测荧光之间的时间差。使用高重复脉冲激发光激发样品,在每一个脉冲周期内,较多激发荧光分子发出一个光子,然后记录光子出现的时刻,并在该时刻记录一个光子,再下一个脉冲周期内也是相同的情况,经过多次计数可以得到荧光光子随时间的分布曲线。相似的,TG则探测不同时间窗口内的荧光强度,通过曲线拟合得到荧光寿命。二是频域测量,对连续激发光进行振幅调制后,分子发出的荧光强度也会受到振幅调制,两个调制信号之间存在与荧光寿命相关的相位差,因此可以测量该相位差计算荧光寿命。北京动物荧光寿命成像使用步骤

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