广州分子荧光寿命成像哪里买

时间:2023年03月17日 来源:

荧光寿命通常来讲是一定的,不受激发光强度、荧光团浓度等因素的影响,只与荧光团所处的微环境有关,因此,利用荧光寿命显微镜(Fluorescence lifetime imaging microscopy, FLIM)对样品进行荧光寿命成像,可以对样品所在的微环境中的许多物理参数如氧压、溶液疏水性等及生物化学参数如pH值、离子浓度等进行定量测量。此外,荧光寿命成像技术还可以同时获得分子状态和空间分布的信息。因此,荧光寿命成像在生物医学领域有广阔的应用前景。荧光寿命成像中的荧光寿命是什么意思?广州分子荧光寿命成像哪里买

影响荧光寿命成像测量的因素:高浓度样品的影响:1)当激发光照射高浓度样品时,在激发光入口附近产生荧光,但这些荧光并不能进入荧光检测器。2)高浓度的分子之间相互作用而发生活性阻碍现象。3)荧光的再吸收:即荧光光谱的短波长端和激发光谱的长波长端如果相互重叠,则发生荧光再吸收。荧光寿命成像具有200 nm的空间分辨率和皮秒量级的时间分辨率。散射光的影响: 主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影响较大。校正办法:先用短的激发光激发,检出溶液的拉曼峰,然后进行荧光光谱校正。因为荧光光谱不随激发光波长的改变而改变,而拉曼光却随之改变。重庆分子荧光寿命成像哪个品牌好荧光寿命成像是什么样的技术?

荧光寿命显微成像技术具有对生物大分子结构、动力学信息和分子环境等进行高分辨高精度测量的能力,因此其重要性日渐提升,被普遍地应用于生物学研究及临床诊断等领域。荧光寿命,分子包含多个能态S0、S1、S2和三重态T1,每个能态都包含多个精细的能级。正常情况下,大部分电子处在较低能态即基态S0的较低能级上,当分子被光束照射,会吸收光子能量,电子被激发到更高的能态S1或S2上,在S2能态上的电子只能存在很短暂的时间,便会通过内转换过程跃迁到S1上,而S1能态上的电子亦会在极短时间内跃迁到S1的较低能级上,而这些电子会存在一段时间后通过震荡弛豫辐射跃迁到基态,这个过程会释放一个光子,即荧光。

影响荧光寿命成像测量的因素有哪些?温度影响:一般说来,荧光随温度升高而强度减弱,温度升高1℃,荧光强度下降1~10%不等。测定时,温度必须保持恒定。PH值影响:PH 值影响物质的荧光,应选择较佳PH制备样品。光分解对荧光测定的影响: 荧光物质吸收紫外可见光后,发生光化学反应,导致荧光强度下降。因此,荧光分析要采用高灵敏度的检测器,而不是用增强光源来提高灵敏度。测定时,用较窄的激发光部分的狭缝,以减弱激发光。同时,用较宽的发射狭缝引导荧光。荧光分析应尽量在暗环境中进行。荧光寿命成像这种技术相对较新,涉及到同时在图像的每个像素处确定荧光衰减时间的空间分布。荧光寿命显微成像技术具有对生物大分子结构、动力学信息和分子环境等进行高分辨高精度测量的能力。

荧光寿命成像不但具有其它荧光显微镜所具有的高灵敏度、可检测人体生物样品等优点,它在监控荧光纳米材料的稳定性上还具有以下几个优势:(1)荧光寿命不受荧光探针的浓度的影响,可排除纳米材料的胞吐及细胞分化导致的纳米颗粒的稀释等对测量的影响;(2)很多常见的发光材料的荧光寿命都远远大于细胞的自荧光的寿命,很易去除生物自荧光对荧光成像的干扰;(3)发光材料的荧光寿命和其材料的稳定性密切相关,荧光寿命的改变可以灵敏地反映相应材料的化学稳定性。荧光寿命成像是一种重要的荧光显微镜技术。影响荧光寿命成像测量的因素是什么?上海显微荧光寿命成像研发

荧光寿命成像技术是通过建立检测到的荧光事件的直方图来确定寿命。广州分子荧光寿命成像哪里买

荧光寿命成像如何理解?荧光寿命成像主要通过TCSPC技术(Time-Correlated Single Photon Counting)实现。系统采用超短脉宽激光器作为激发光源,通过光路耦合器,将激光引入显微光路。激光通过物镜聚焦照射样品池,利用光子探测装置(PMT)对荧光信号进行探测,再用TCSPC计数器对每一个光子进行计数,并将其放入一个对应的时间窗口,经过一定时间的统计叠加后即得到荧光寿命曲线。几十万次重复以后,不同的时间通道累积下来的光子数目不同。以光子数对时间作图可得到荧光衰减曲线。实现从百ps-ns-us的瞬态测试。综上所述由于TCSPC系统,一个激光脉冲只采集一个光子信号,所以激光器的重复频率决定了系统的数据采集速度。重频越高,采集速度越快,数据信噪比越好。广州分子荧光寿命成像哪里买

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