重庆显微镜技术改造

典型的共焦显微镜装置是在被测对象焦平面的共轭面上放置两个小孔，其中一个放在光源前面，另一个放在探测器前面，如图1所示。由图可知，当被测样品处于准焦平面时，探测端收集到的光强比较大；当被测样品处于离焦位置时，探测端的光斑发生弥散，光强迅速减小。因此，只有焦平面上的点所发出的光才能透过出射针（zhen）孔，而焦平面以外的点所发出的光线在出射针（zhen）孔平面是离焦的，绝大部分无法通过中心的针（zhen）孔。因此，焦平面上的观察目标点呈现亮色，而非观察点则作为背景呈现黑色，反差增加，图像清晰。在成像过程中，两针（zhen）孔共焦，共焦点为被探测点，被探测点所在的平面为共焦平面。探针台显微镜选用的是长工作距离物镜；重庆显微镜技术改造

显微镜使用注意事项：

▪显微镜样本一定要保持干净，如有盖片样本，一定要干净干燥，以免样本上的试剂污染物镜。

▪不要用手直接触摸光学部件的表面（如物镜，荧光滤块，目镜等）。

▪手动显微镜换物镜时，不要抓着物镜转，要转动物镜转盘。▪荧光光源金属卤化物灯使用时注意开关间隔少30分钟。

▪样本用油镜观察后，如还需用空气镜观察，要把样本上的油擦干净再观察，以免样本上的油污染空气镜。▪油镜观察时，请使用与显微镜配套的专业镜油，不要使用其他介质（香柏油等），使用完显微镜后，及时擦掉物镜上的镜油，比较好将其他物镜也清洁一遍。清洁液以无水乙醇为主。

▪调焦时，为避免镜头撞到样本，先将物镜调到离样本近端，然后在镜下向离物镜远端调焦到样本清晰。▪显微镜使用过程中，镜体、灯箱及电源等位置应无遮挡或覆盖，以免影响散热从而损耗显微镜寿命。

▪显微镜使用完后，等灯箱部分冷却后，再盖上防尘罩。

▪显微镜包含很多光学部件，避免显微镜碰撞，以保护光学系统。

▪显微镜属精密仪器，如需搬动，拆修，请联系蔡司专业人员。 江苏金相显微镜显微镜不同的照明方式，观察成像也不同。

显微镜的观察方式，你知道几种？

荧光成像在如今的科研中已经广泛应用，无论是荧光免疫组化染色、融合蛋白转基因表达，还是荧光染料染色，这些方式都对蛋白的定位和定量分析，细胞的动态变化，组织结构的观察，蛋白的共定位起到重要的影响。荧光成像的原理基于荧光分子获得能量后从高能态跃迁回低能态所释放出的荧光信号。激发这种状态可以使用各种光源，例如普通荧光显微镜使用的金属卤化物灯，LED荧光灯，共聚焦显微镜和双光子显微镜使用的激光。

需要记住的是，不同的荧光成像方式适合不同的研究对象：✓由于sCOMS相机的快速成像特点，在钙成像上普通荧光显微镜具有速度优势。✓共聚焦较好的信噪比和分辨率特点适合多色高分辨高对比成像。✓利用双光子光漂白少的特性，对活细胞或动物成像具有优势。✓利用不同的染料和荧光蛋白特性，还可以进行更多更复杂的荧光成像实验。材料样品也不甘寂寞，它们不像生物样品那样需要特定的染料进行标记，一般都是以自发荧光的方式来呈现它们多彩的一面。比如树脂材料，纤维等样品，利用这一特点可以对样品进行缺陷检测等应用，为科研和生产提供保障。

显微镜的使用方法及步骤：1、取用和放置使用时首先从镜箱中取出显微镜，一手握持镜臂，一手托住镜座，保持镜身直立，不可用一只手倾斜提携，防止摔落目镜。轻取轻放，放时使镜臂朝向自己，距桌边沿5-10厘米处。桌子平衡，桌面清洁，避免直射阳光。

2、开启光源打开电源开关

3、放置玻片标本将待镜检的玻片标本放置在载物台上，材料正对通光孔中间。再用弹簧压片夹在玻片的两端，防止玻片标本移动。若为玻片移动器，则将玻片标本卡入玻片移动器，然后调节玻片移动器，将材料移至正对通光孔**的位置

4、低倍物镜观察用显微镜观察标本时，应先用低倍物镜找到物像。其法如下：(1)转动粗调螺旋，用眼从侧面观望，使镜筒下降，直到低倍物镜距标本0.5厘米左右为度。(2)用左眼从目镜中观察，右眼自然睁开，用手慢慢转动粗调螺旋，使镜筒渐渐上升，直到视野内的物像清晰为止。此后改用微调螺旋，稍加调节焦距，使物像**清晰。(3)用手前后左右轻轻移动玻片或调节玻片移动器，便可找到欲观察的部分。要注意视野中的物像为倒像，移动玻片时应向相反方向移动。

在使用显微镜时要细心和耐心，勿操之过急，动作过猛，以防操作失误而损坏构件。不要用手触摸光学玻璃部分，防止剧烈碰撞而损坏构件 电子显微镜与光学显微镜；

共聚焦显微镜是由显微镜光学系统、激光光源、扫描器及检测及处理系统4部分组成，采用相干性较好的激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置，并利用计算机对图象进行处理的一套观察、分析和输出系统。激光扫描束通过光栅针（zhen）孔形成点光源，经过分光镜反射至物镜，聚焦在在标本上并进行扫描。样品受到激发后，发出的荧光回到分光镜聚集到探测针（zhen）孔，之后经过光电倍增管转化为电信号传输到计算机上显示为清晰的焦平面图像。激发光通过光栅针（zhen）孔聚焦在样品上，荧光通过物镜聚焦在针（zhen）孔上，此过程中形成两次聚焦，故被称为共聚焦显微镜。

主要应用于：生物学领域、高分子化学领域、表面粗糙度领域。 共聚焦显微镜主要的观察对象是荧光。南昌定制显微镜

透射电子显微镜和扫描电子显微镜；重庆显微镜技术改造

显微镜透射照明的方式有两种：（2）柯勒照明柯勒照明光学系统如图2所示。光源经聚光镜前组成像在照明系统的视场光阑上；聚光镜前组经过聚光镜后组成像于标本处，同时也把照明系统视场光阑成像在无限远处，使之与远心物镜的入射光瞳重合。柯勒照明中的前组聚光镜称为柯勒镜，它得到了光源的均匀照明，经过聚光镜后组成像在标本上。故标本上得到均匀的照明，这是柯勒照明的重要特点。聚光镜中的孔径光阑紧贴聚光镜前组，通过聚光镜后组所成的像，即聚光镜的出射光瞳也与显微镜的物平面（标本）贴近，故光阑起到了限制显微镜视场的作用。柯勒照明聚光系统的出射光瞳和像方视场分别与显微镜的物方视场和入射光瞳重合，从而形成“视场对瞳、瞳对视场”的光管。重庆显微镜技术改造

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