江苏植物荧光寿命成像供应
荧光寿命成像:作为荧光成像中除光谱和强度之外的新维度,当前,荧光寿命成像主要应用领域包括:用于样品分离,如利用不同染料荧光寿命的差异将不同组织、正常与病变细胞等有效分离。荧光团在光谱上非常相似(max 580 vs 573)无法分离,但它们在荧光寿命上差异明显。作为生物传感器,如评价药物/理化条件对细胞的影响、Ca+震荡等。充分拓展了寿光命成像的使用范围,实现可相互验证的多维度样品成像。实现真正的生物动力学分析和功能成像。荧光寿命成像在生物医学领域有广阔的应用前景。江苏植物荧光寿命成像供应
荧光寿命成像或FLIM是基于荧光样品中不同区域的荧光的指数衰减速率的差异。由τ决定荧光寿命成像的每个像素的强度,这使研究人员可以查看具有不同荧光衰减率的材料之间的对比度,还可以产生显示其他衰减路径变化的图像。可以通过使用脉冲源在时域中确定荧光寿命。当荧光物质被超短脉冲激发时,时间分辨的荧光将呈指数衰减。时间相关单光子计数(tcspc)通常被用作荧光寿命的测量方法,因为它补偿了在源强度和单光子的脉冲幅度的变化。更具体地说,TCSPC由单个光子雪崩光电二极管(SPAD)记录相对于激发激光脉冲的单个光子的寿命。重复记录多个激光脉冲,并在记录了足够多的事件后,研究人员能够建立所有这些记录的时间点上事件数量的直方图。然后,可以将该直方图拟合到的指数寿命衰减函数的指数函数,并且可以相应地提取寿命参数。深圳生物荧光寿命成像费用荧光寿命成像通常用于研究生物分子间相互作用、细胞中的信号事件或区分光谱重叠的荧光团。
荧光寿命成像FLIM相比于荧光强度成像更有优势。通过荧光强度成像可以获得荧光分子的空间分布,较为直接和简便,但是当荧光分子具有相似的频谱特性,或是同样的荧光分子在不同环境下时,依赖强度进行成像的方案便无法准确反映信息。与基于光强的成像方式不同,荧光寿命成像FLIM适用于测量荧光分子环境的变化,或是测量分子的运动情况。其结果与荧光分子浓度无关,且不受影响光强的光散射或是光吸收影响,可以精确测量荧光淬灭过程,对生物分子微环境进行定量测量。
荧光寿命成像是一种新型的荧光成像技术,它能够对不同种类或处于不同状态的生物组织提供更好的对比度,并反映荧光团及其所处微环境参数的定量分布。荧光寿命成像一般不受诸如激光或荧光强度扰动、荧光染料分布不均匀、染料的光漂白以及其他有碍荧光强度的因素的影响,是荧光光谱分析法的有效补充。超快激光技术,高速、高灵敏度探测技术,以及图像处理技术的发展,都促进了FLIM 技术的发展.尤其是将荧光寿命成像和共焦显微技术以及多光子激发荧光显微技术结合,进一步拓宽了FLIM在生物学领域的应用范围。荧光寿命成像已用于骨骼和牙齿的诊断。
典型的荧光寿命成像包括从感兴趣区域(ROI)的共焦图像中提取1-,2-或3-衰减时间。限制荧光团的衰减速率可能是任意的,而且很复杂,因为在细胞环境中存在几种衰减速率。对于相量图,关于选择哪种衰减模型以及评估拟合优度的挑战性决定已成为过去。在相量图中,所有原始FLIM数据在向量空间中均表示为相位和幅度。图像中的每个像素都转换为相量图中的一个点。单独于其在图像中的位置,具有相似衰减特征的像素在相量图中形成群集。可以在此阵列中选择不同的相量簇,并在标注中反向注释对应的像素。荧光寿命成像技术有两种:时间域和频率域。湖南多色荧光寿命成像报价
时域和频域技术在各种荧光显微寿命成像平台中都有应用。江苏植物荧光寿命成像供应
市场上荧光寿命的测量方式可分为时域法和频域法,两者在本质上是相通的,测量精度相近,频域技术是时域法的傅里叶变换的延伸。时域和频域技术在各种显微寿命成像平台中都有应用,时间相关单光子计数方法(TCSPC )是常见的时域技术,而新兴的数字频域技术(FastFLIM™ )则取代了传统的模拟频域技术,凭借其独恃的优势成为应用广的频域技术。荧光寿命成像主要通过TCSPC技术(Time-Correlated Single Photon Counting)实现。由于TCSPC系统,一个激光脉冲只采集一个光子信号,所以激光器的重复频率决定了系统的数据采集速度。重频越高,采集速度越快,数据信噪比越好。江苏植物荧光寿命成像供应
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