动物细胞样本外泌体载药

采用外泌体可以有效地包载药物，提高药物的生物利用度。而且对外泌体进行必要的修饰，可以使药物准确靶向到中流部位，从而降低药物的毒副作用。目前多种不同形式的外泌体已经被研究开发装载小分子药物用于中流疾病的zhiliao。Tian等利用未成熟树突状细胞衍生的外泌体负载DOX并靶向递送药物到中流组织中。体外细胞实验表明，负载DOX的iRGD靶向肽外泌体（iRGD－EXOs－DOX）杀死了多达80％的乳腺ai细胞，几乎与游离DOX对照组相当。体内实验证明，iRGD－EXOs－DOX在荷瘤小鼠体内句有良好的靶向性，能准确定位到中流组织，明显抑制中流的生长，同时极大地降低了DOX对心脏的毒性。外泌体可以包载疏水性的姜黄素，提高其溶解度、稳定性和体内生物利用度。动物细胞样本外泌体载药

小分子siRNA、miRNA常作为基因zhiliao的核酸药物，但其稳定性差，极易被体内的酶降解，限制了它在临床中的运用。而外泌体的脂质双分子层结构可以保护基因类药物，避免其降解。其次，外泌体能通过膜融合的方式直接将包载的基因类药物释放到受体细胞中，实现更高的投递效率。许多研究证明外泌体能成功递送小分子siRNA、miRNA。通过体外实验证明，来源于血浆的外泌体可以有效地传递siRNA到单核细胞和淋巴细胞，使MAKP1基因沉默。利用类似的方法递送RAD51- siRNA和RAD52－siRNA到HELA细胞和纤维素肉瘤细胞中从而诱导两个基因的沉默，研究证明RAD51基因的沉默可以造成中流细胞大量的凋亡，因而通过外泌体负载siRNA用于中流疾病方面的zhiliao句有广阔的前景。江苏整体实验外泌体载药实验服务对于水溶性的药物可用电穿孔的方法将药物载入外泌体中。

中流细胞通常过表达正常细胞中不存在的表面特异性受体，这些受体可能是其外泌体靶向中流细胞的基础。利用中流细胞外泌体对其表面特异性受体的识别，有望将zhiliao药物靶向传递到病变细胞，与普通细胞分泌的外泌体相比，可达到更高的靶向效率。临床上常见的肺ai病理学类型是非小细胞肺ai，其中A549细胞呈鳞状，含有高度不饱和脂肪酸，能够有效维持细胞膜完整性，可较好地模拟中流生长，因此被广fan用于体外研究。以A549中流细胞外泌体为载体，采用电穿孔法包载多烯紫杉醇，构建一种句有肺ai主动靶向性的递药系统，并采用响应面法优化了其载药工艺。

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——梯度密度离心法。外泌体的密度在1.1~1.19kg·L-1之间,因此,可以采用密度梯度离心法来分离外泌体。该方法是将超速离心结合蔗糖密度梯度或蔗糖垫结合,原理是先除去非囊泡物质,再通过梯度密度浓缩提取外泌体,该方法可以得到相对较为纯净的外泌体。传统的梯度密度方法通常需要离心16h,但是2012年,研究者使用了62~90h才分离出某些确切囊泡,因此,该方法可能不足以沉淀所有的外泌体。如果离心时间不充足,污染物质可能和外泌体保持在相同的密度层,特别是这个密度范围又比较宽。外泌体作为药物载体可以载带多种蛋白质，实现靶向给药和稳定酶活性等目的。

phil作为连翘的主要药效成分之一，具有广fan药理作用，但极性较小、渗透性差、体内吸收较差、代谢较快，phil可促进肺中流组织中endostatin的表达，下调血管内皮生长因子（VEGF）表达，共同抑制中流xue管的生成。以磷脂和胆固醇为载体将phil制备成脂质体纳米粒，增强了phil的抗氧化活性，缓释性增强；采用聚山梨酯-80将挥发油和phil制成纳米胶束，提高了phil的溶解度，增强了phil的透皮吸收。用外泌体作为药物载体，制备一种负载连翘苷的外泌体递药系统（phil-exo）。制备的phil-exo被A549细胞摄取良好，对A549细胞迁移具有较高抑制作用，明显提高phil的抗中流细胞迁移能力，这可能是由于细胞分泌所得外泌体粒径极小易于透过细胞，有助于改善phil的难以渗透细胞膜和不稳定性。间充质干细胞外泌体能递送14-3-3ζ预防顺铂造成的肾毒性损伤，具有修复肾损伤的作用。四川如何验证外泌体载药成功

口服递送装载紫杉醇(PAC)的外泌体作用于人肺ai荷瘤小鼠,其中流的生长明显受到抑制。动物细胞样本外泌体载药

与人工合成囊泡相比，外泌体虽然具有一定的靶向性，但由于其高度的复杂性和成分的多样性，作为载药体的应用仍缺乏普遍靶向性，可能产生脱靶效应，诱发不良反应;而且可溶性低，循环半衰期短，因此针对外泌体表面标志物的改造以获得靶向性一直是研究热点;此外，也有大量研究针对内容物进行改造，近年来主要以外源性的抗中流药物、核酸分子、转录因子和酶类，内源性母乳多糖、低聚糖、多肽等为“货物”，将它们载入外泌体后运送到标靶位置。对母乳外泌体进行载药改造，既保留了外泌体本身的特性，同时充分利用了功能性内外源物质，又可进一步优化外泌体的靶向性与稳定性，有望为zhiliao新生儿相关疾病提供新的思路和方法。动物细胞样本外泌体载药

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