苏州高通量测序单细胞测序技术支持

时间:2022年09月01日 来源:

单细胞测序是指针对单个细胞进行全转录组测序分析,可精确地描述每一个细胞的状态,在异质性发育过程中具有特殊的应用价值。然而,单细胞测序无法给出固态异质化组织中细胞空间排布信息,对于揭示发育过程、病理微环境都存在很大的局限性。空间转录组测序以点阵形式记录病理切片细胞的空间信息并进行测序,可以精确指示点阵内的全部基因表达情况。空间转录组测序的加入,无疑让单细胞测序如虎添翼,更精确地勾勒了组织水平的异质性。烈冰测序服务已助力300余篇国际期刊研究文章发表。苏州高通量测序单细胞测序技术支持

单细胞获得困难,不同组织要求不尽相同难以搞定?烈冰2000+项目消化经验,100+组织类型解离protocol,精心设计不同组织实验的解离、细胞悬浮实验体系,确保单细胞的获得。冻存样本无法实验,珍贵样本无法使用?烈冰采用国际认可的冻存组织复苏技术以及死细胞过滤技术,确保冻存组织使用。珍贵样本,细胞数量太少,消化背景杂无法做单细胞?采用国际认可的10XGenomics,BDRhapsody双平台模式,根据样本实际情况和用户需求提供客观有效的实验方案,细胞量少,背景杂也能做单细胞。单细胞RNA分类精度不足,部分细胞无法细分?烈冰同时采用单细胞蛋白质组与单细胞转录组测序技术,真正做到从上游到下游的全流程检测,确保超高的细胞分类精度。10X Chromium X单细胞测序技术支持单细胞测序数据分析,认准烈冰NovelBrain生物信息数据分析平台。

烈冰生物成立于2010年,与时俱进,坚持为科研学者提供国际前沿的高通量测序实验和深度的生物信息数据分析服务,已逐步发展为单细胞多组学检测服务****。专注于“单细胞测序系列技术服务”的专精领域,在上海、北京、广州、西安和江西等地拥有数千平办公场所,并布局多中心产品研发生产基地和营销、运营中心。2016年起连续被评为上海市****,60+项自主知识产权,转化率近80%。产品覆盖从单细胞测序,核测序,单细胞多组学,空间转录组测序等多组学联合的实验+数据分析全流程服务平台。为600+国内高校和医院、5000+深度合作学者用户、10000+生命科学探索的重要科研项目在医药开发、科学研究、医学及临床研究,疾病分子标志物筛选、生命和神经发育研究等提供多层次、多组学检测服务和解决方案,助力300+CNS国际学术期刊文章发表,30+篇单细胞技术联合(助力)发文,IF10+文章占比>65%。

一味的追求高细胞数量的捕获,小心得不偿失,原因在这:单细胞测序所有的分析都是基于细胞聚类进行,而细胞聚类是在区分cell和non-cell后,获得细胞基因表达谱,通过降维(pca),无监督聚类以及可视化(t-SNE)得到的。进行细胞聚类时需要考虑到每个细胞的基因表达模式,因此即使是相同的数据,在剔除几个细胞的情况下,前后获得的聚类图也会出现明显不同。而当细胞捕获数过多时,无论是假阴性和假阳性数据还是多细胞数据,都会对正常细胞聚类产生影响,造成聚类结果失真。这也是很多文章,特别是很多高分文章,为什么单个样本捕获细胞数在2000-3000的原因了。烈冰建议单个样本捕获细胞数在3000-5000个时,数据量在100G左右时,可以满足分析和文章发表的多重需求。烈冰引进国际主流单细胞和空间转录组测序平台,保障细胞精度的前提下提供组织内部精细区域的空间信息。

单细胞测序实验再样本细胞上机分选签,需要对细胞数量、细胞活性进准判断,这对SingleCell分选标记、建库、下机数据的质量都具有着决定性的作用。如若细胞计数偏高,将会影响建库的成功率;计数偏低,则会提高双细胞的比例;而细胞活率过低,就会使测序数据的利用率大打折扣,因此把好单细胞悬液质量这一关尤为重要。而在铺板过程中,由于不同操作人员手法具有不可避免的差异,不同的液体流速将直接影响单细胞的入孔效果。因此烈冰生物BDRhapsody单细胞分选平台配套了专门定制的电动移液器,其具有PrimeTreat、CellLoad、BeadLoad、Wash、Lysis、Retrieval多种操作模式,来对应各种不同的操作。通过已经设定的程序来控制液体的流速,大幅度降低人为操作习惯带来的差异,保证实验操作的一致性。烈冰生物成立于2010年,专注于单细胞测序领域科研服务。长春单细胞测序数据分析

烈冰科技已建立了多种国际和国内主流的高通量测序实验平台。苏州高通量测序单细胞测序技术支持

二代测序技术在测序方法上取得了重大突破,基于“边合成边测序”(sequencingbysynthesis)和大规模平行测序技术(massiveparallelanalysis,MPS),使测序通量和读取速度得到极大提升,例如IlluminaSolexa测序仪。Illumina的测序原理可以简化为四步:样品文库构建、簇生成、测序和数据分析。由于读长限制,样品DNA或由RNA逆转录得到的cDNA需要被打断成300-500bp的片段,并在3和5端接上3种序列:1)Index,用于区分样品来源;2)Adapter,用于结合测序通道上的位点;3)Primerbindingsite,用于结合PCR引物启动扩增反应。


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