江苏高效液相色谱外泌体

外泌体膜染料：PKH67、PKH26

组成：方法一：外泌体直接染色1.适量（10ug，BCA法测量）外泌体溶于500ulDiluentC中（可以用DPBS代替）；2.适量的PKH26（10ug外泌体推荐用量不超过1ul）染料溶于等体积的DiluentC中（可以用DPBS代替），温和吹打混匀；3.将步骤2中的溶液加入1中并迅速吹打混匀。4.避光，室温静置孵育5-10min；5.加入等体积（2ml）的血清（exosomefree），或者1%BSA终止染色反应；6.使用超滤/超离方式洗净未与外泌体结合的PKH26染料。方法二：通过细胞染色间接对外泌体染色1.2×107细胞500g，5min离心，尽量弃去上清。2.加入1mlDiluentC，温和吹打混匀。3.将4ulPKH26储存液加入1mlDiluentC中（可以用DPBS代替），温和吹打混匀；4.将步骤2中制备的细胞悬液加入步骤3中的制备的PKH26工作液，快速吹打混匀后室温静置孵育5min；5.加入等体积（2ml）的血清（exosomefree），或者1%BSA终止染色反应；6.使用超滤/超离方式洗净未与外泌体结合的PKH26染料。注意：染色后的外泌体请立即使用或储存于-80℃ 推荐一下外泌体研究的生物公司。江苏高效液相色谱外泌体

外泌体提取试剂盒 （细胞培液）本说明书适用于翌科生物公司外泌体提取试剂盒系列产品（针对细胞培液）。

样品准备1.新鲜的细胞培液样品，置于冰上待用；若为冻存的样品，可于室温解冻后置于冰上待用。2.将细胞培液样品涡旋混匀，根据实验需求取适量体积转移至离心管中，4℃，1000×g离心10min，弃沉淀，并将上清转移至新的离心管中。

外泌体分离1.转移样本至新管，加入与细胞培夜等体积的ExosomeIsolationReagent；2.涡旋混匀，此步后溶液将变混浊。3.放入4℃冰箱静置过夜；4.4℃，3220g离心60min，弃上清，外泌体沉淀存留在离心管底部；5.用适量PBS重悬外泌体沉淀，存放于4℃（不超过1周）或-20℃/-80℃（长时间保存）。

注意事项1、使用前需将ExosomeIsolationKit充分混匀。2、细胞培液样品建议用0.22μm滤器过滤后再进行外泌体提取操作。3、操作过程需佩戴一次性手套操作,尽量在超净台内或洁净的环境进行。 北京比较好的外泌体哪家好翌科生物做外泌体研究吗？

外泌体的提取主要包括以下几种方式。一是超速离心法，这是外泌体提取比较常用的方法。此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足，电镜鉴定时发现外泌体聚集成块，由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准，也有一些研究认为此种方法得到的是微泡不是外泌体。二是过滤离心，这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性，但同样存在纯度不足的问题。三是密度梯度离心法，用此种方法分离到的外泌体纯度高，但是前期准备工作繁杂，耗时，量少。四是免疫磁珠法，这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备，但是非中性pH和非生理性盐浓度会影响外泌体生物活性，不便进行下一步的实验。五是PS亲和法，该方法将PS（磷脂酰丝氨酸）与磁珠结合，利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似，获得的外泌体形态完整，纯度比较高。由于不使用变性剂，不影响外泌体的生物活性，外泌体可用于细胞共培养和体内注射。2016.9《ScientificReports》杂志发表了该方法比较新数据，表明PS法可提取相当高纯度的外泌体

外泌体的生成，微泡是由质膜的出芽形成的，膜双层通过磷脂的不对称分布来维持脂质的“多面性”。外层富含磷脂酰胆碱和鞘磷脂，而内层主要由磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺形成。然而，胞质Ca2+的内流可以破坏这种不对称性，导致磷脂跨膜双层的重新分配，促进膜起泡。依赖Ca2+的蛋白水解同时降解膜相关的细胞骨架，促进出芽过程。在外泌体形成过程中，首先，MVE(多囊体)向内芽形成小泡，内含来自细胞质的货物(蛋白质、mRNA和miRNAs)。然后，MVE要么与细胞膜融合释放外泌体(内囊泡)，要么与溶酶体融合降解MVE含量。到达目的地后，外泌体通过内吞途径或与靶细胞膜融合，将其内容物释放到细胞质中。细胞的膜的囊泡也可以直接从细胞膜上萌发，携带活性蛋白、RNA和其他化合物。翌科生物做外泌体检测服务怎么样？

外泌体提取试剂盒 （血清、血浆）。翌科生物公司外泌体提取试剂盒系列产品（针对血清、血浆）。外泌体是大小约为30-150纳米的微小囊泡，存在于血清、血浆、唾液、尿液和母乳等体液中。传统的外泌体提取方式，如超速离心等耗时长、操作繁琐、得率低，本公司产品可便捷地从血清、血浆等样本中提取外泌体，提取后的外泌体能用于细胞试验、动物试验、电镜分析、NTA鉴定、Western Blot、RT-qPCR分析等。产品组分组分：ExosomeIsolationReagent货号：EK-21001-10EK-21001-20EK-21001-50规格：10/20/50mL（针对血清、血浆）储存条件：0-4℃（保质期24个月） 值得推荐的外泌体研究公司。高校做外泌体分析

翌科生物是做外泌体提取吗？江苏高效液相色谱外泌体

外泌体（exosome）*适用于通过特殊手段拿到的由胞内体来源的释放到细胞外的膜泡结构。建议对细胞外囊泡进行细分时使用物理上的界定如小细胞外囊泡（sEV）和中/大细胞外囊泡（m/lEV），或者高密度囊泡（highdensity）和低密度囊泡（lowdensity）等，同时也建议使用表面蛋白来界定如CD63+CD81+细胞外囊泡等。当使用exosomes等称呼时应当进行严谨的实验证明使用的“exosomes样品”是由胞内体途径产生的。南京英瀚斯生物专业外泌体检测相关仪器齐全。江苏高效液相色谱外泌体

南京翌科生物科技有限公司致力于商务服务，以科技创新实现***管理的追求。翌科生物拥有一支经验丰富、技术创新的专业研发团队，以高度的专注和执着为客户提供外泌体提取，非编码RNA试剂，检测试剂，转染试剂。翌科生物致力于把技术上的创新展现成对用户产品上的贴心，为用户带来良好体验。翌科生物始终关注自身，在风云变化的时代，对自身的建设毫不懈怠，高度的专注与执着使翌科生物在行业的从容而自信。