全国药物外泌体提取试剂盒

时间:2022年02月09日 来源:

外泌体提取试剂盒 (细胞培液)本说明书适用于翌科生物公司外泌体提取试剂盒系列产品(针对细胞培液)。

样品准备1.新鲜的细胞培液样品,置于冰上待用;若为冻存的样品,可于室温解冻后置于冰上待用。2.将细胞培液样品涡旋混匀,根据实验需求取适量体积转移至离心管中,4℃,1000×g离心10min,弃沉淀,并将上清转移至新的离心管中。

外泌体分离1.转移样本至新管,加入与细胞培夜等体积的ExosomeIsolationReagent;2.涡旋混匀,此步后溶液将变混浊。3.放入4℃冰箱静置过夜;4.4℃,3220g离心60min,弃上清,外泌体沉淀存留在离心管底部;5.用适量PBS重悬外泌体沉淀,存放于4℃(不超过1周)或-20℃/-80℃(长时间保存)。

注意事项1、使用前需将ExosomeIsolationKit充分混匀。2、细胞培液样品建议用0.22μm滤器过滤后再进行外泌体提取操作。3、操作过程需佩戴一次性手套操作,尽量在超净台内或洁净的环境进行。 外泌体在分泌细胞和受体细胞间的穿梭介导了细胞间的生物分子传递。全国药物外泌体提取试剂盒

外泌体是包含了复杂RNA展的总外泌体分离试剂从细胞培养基或任何体液中即刻分离完整的外泌体。这些试剂及其随附的方案是多种试验的理想选择,包括处理少量样本和处理多个样本。从细胞培养物中富集的总外泌体(使用“总外泌体分离”试剂或超速离心)可以通过免疫磁珠捕获进一步纯化特定的亚群。使用基于Dynabeads的CD9、CD63、CD81或EpCam特异性试剂,或将链霉亲和素试剂与您选择的生物素化抗体结合,以基于表面抗原,纯化所有群体。北京哪家做外泌体研发翌科生物的外泌体做的怎么样?

外泌体由细胞在正常和病理条件下释放。携带几种类型的货物分子,如核酸和蛋白质,因此,被认为是至关重要的生物标志物的发现对于临床诊断。载有肿瘤特异性RNA的外泌体被用作**诊断的生物标志物,外泌体蛋白被认为是多种疾病的潜在生物标志物,包括**、肝脏疾病和肾脏疾病。它们含有多种生物标志物,如TSG101、带电荷的多泡体蛋白2a(CHMP2A)、RAS相关蛋白Rabb-11b(RAB11B)、CD63和CD81蛋白和脂类,包括胆固醇、鞘磷脂、神经酰胺和磷脂酰丝氨酸。外泌体的大分子成分在细胞功能和病理状态中发挥重要作用,如炎症、免疫反应、血管生成、细胞死亡、神经退行性疾病.

外泌体膜染料:PKH67、PKH26

组成:方法一:外泌体直接染色1.适量(10ug,BCA法测量)外泌体溶于500ulDiluentC中(可以用DPBS代替);2.适量的PKH26(10ug外泌体推荐用量不超过1ul)染料溶于等体积的DiluentC中(可以用DPBS代替),温和吹打混匀;3.将步骤2中的溶液加入1中并迅速吹打混匀。4.避光,室温静置孵育5-10min;5.加入等体积(2ml)的血清(exosomefree),或者1%BSA终止染色反应;6.使用超滤/超离方式洗净未与外泌体结合的PKH26染料。方法二:通过细胞染色间接对外泌体染色1.2×107细胞500g,5min离心,尽量弃去上清。2.加入1mlDiluentC,温和吹打混匀。3.将4ulPKH26储存液加入1mlDiluentC中(可以用DPBS代替),温和吹打混匀;4.将步骤2中制备的细胞悬液加入步骤3中的制备的PKH26工作液,快速吹打混匀后室温静置孵育5min;5.加入等体积(2ml)的血清(exosomefree),或者1%BSA终止染色反应;6.使用超滤/超离方式洗净未与外泌体结合的PKH26染料。注意:染色后的外泌体请立即使用或储存于-80℃ 告诉你如何选择一家好的做外泌体的公司 !

外泌体的提取主要包括以下几种方式。一是超速离心法,这是外泌体提取比较常用的方法。此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足,电镜鉴定时发现外泌体聚集成块,由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准,也有一些研究认为此种方法得到的是微泡不是外泌体。二是过滤离心,这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样存在纯度不足的问题。三是密度梯度离心法,用此种方法分离到的外泌体纯度高,但是前期准备工作繁杂,耗时,量少。四是免疫磁珠法,这种方法可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备,但是非中性pH和非生理性盐浓度会影响外泌体生物活性,不便进行下一步的实验。五是PS亲和法,该方法将PS(磷脂酰丝氨酸)与磁珠结合,利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似,获得的外泌体形态完整,纯度比较高。由于不使用变性剂,不影响外泌体的生物活性,外泌体可用于细胞共培养和体内注射。2016.9《ScientificReports》杂志发表了该方法比较新数据,表明PS法可提取相当高纯度的外泌体翌科生物是不是专做外泌体检测服务,医学实验,医学模型构建吗?北京哪家做外泌体研发

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外泌体

血浆、血清外泌体提取试剂盒细胞培养基外泌体提取试剂盒尿液外泌体提取试剂盒肺泡灌洗液外泌体提取试剂盒其他体液外泌体提取试剂盒外泌体膜染料:PKH67、PKH26外泌体鉴定抗体:CD63、CD9、TSG101。

外泌体提取外泌体鉴定套装:WB、电镜、粒径外泌体标记组织外泌体分离。
外泌体是大小约为30-150纳米的微小囊泡,guang泛存在于血清、血浆、唾液、尿液和母乳等体液中。传统的外泌体提取方式,如超速离心等耗时长、操作繁琐、得率低,本公司产品可便捷地从血清、血浆等样本中提取外泌体,提取后的外泌体能用于细胞试验、动物试验、电镜分析、NTA鉴定、WesternBlot、RT-qPCR分析等。 全国药物外泌体提取试剂盒

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