重庆测序外泌体平台
外泌体（Exosomes）是一种直径在40～100nm的圆形单层膜结构，是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分，如微小RNA(microRNA，miRNA)、长链非编码RNA和mRNA、环状RNA（circularRNA，circRNA）。外泌体所携带的这些RNA统称为外泌体来源RNA，具有完整的序列结构和生物活性。云序生物mRNA测序服务针对不同样品类型采用差异化的技术策略，不仅能够检测常规样品，还能够检测降解样品和微量样品。客户可以根据样品情况，灵活选择。此外，云序生物还拥有独特的疾病和基因功能数据库，可以深入分析与特定疾病或信号通路相关的基因的表达、可变剪切以及突变等，从而帮助客户从海量数据中快速找到与自身研究背景相关的候选基因。样品运输：样品置于1.5mLEppendorf管中，封口膜封好，干冰运输。重庆测序外泌体平台
近来外泌体在MSCs中的作用机制正被普遍关注和研究，其内容物可以通过参与细胞间的信息传递和信号传导，以及在体内改变细胞或组织代谢，影响机体的损伤修复，并参与tumour、感ran等疾病的诊断及医治。MSCs的外泌体包含细胞因子、生长因子、信号脂质、各种mRNA和调节 miRNA等内容物。由于其纳米大小的尺寸和脂质外层特性，将其注入后，很容易通过血液循环到达损伤部位。目前MSCs来源的外泌体已用于器guan损伤动物模型、tumour抑制及免疫应答调控模型等多项研究。海南修饰外泌体miRNA测序密度梯度离心法：用此种方法分离到的外泌体纯度较高，但是前期准备工作繁杂。
目前，外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。超速离心：耗时耗力，往往需要8-30个小时；每次较多只能处理6个样品；需要大量的起始材料；产量不高。需一台超速离心机。将欲提取的细胞培养上清液10ml，在4℃的环境下，300×g10min，2000×g20min，弃沉淀，去除细胞；然后l0,000×g30min，弃沉淀，去除亚细胞成分；再用10,000×g60min，弃掉上清液，较后所得沉淀既为exosome，用30mlPBS溶液重新悬浮沉淀物，混匀后再以10,000×g60min，用lmlPBS溶液悬浮沉淀物提纯的exosome溶液分别装入eppendorf管内，置于-80℃冰箱内保存备用。
外泌体于1983年被发现，是由于细胞膜内吞形成内体，内体限制膜发生多处凹陷，向内出芽形成微囊泡，从而形成的具有动态亚细胞结构的多囊泡体。大多数类型的细胞均可分泌外泌体。构成外泌体的主要成分为蛋白质、核酸和脂质。外泌体有多种分泌途径，对细胞间通信、疾病的传播及组织修复具有重要的调节作用。外泌体与受体细胞的结合方式多种多样，外泌体可以将膜蛋白或其内容物转移至受体细胞，也可以直接与受体细胞膜融合；此外，外泌体上的跨膜蛋白还可以直接作用于受体细胞膜表面的信号分子。外泌体普遍存在于生物体的免疫应答反应中，外泌体可以通过介导促炎症反应来促进免疫反应，tumour细胞分泌的外泌体还可以抑制免疫反应。免疫磁珠法：可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单，但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。
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外泌体中携带有多种蛋白质、脂类、RNA等重要信息。重庆测序外泌体平台
虽然研究者对细胞释放外泌体的具体过程知之甚少，但大多数含有内膜系统的哺乳动物细胞均可分泌外泌体。外泌体有多种分泌途径：一种是组成型分泌途径，例如免疫系统的B细胞、树突状细胞(DCs)和肥大细胞，对外泌体的研究大部分来自于免疫细胞，而目前在非免疫细胞中生理性外泌体的分泌很大程度上是未知的；另一种途径是通过细胞间相互作用刺激分泌外泌体，例如鼠DCs在与抗原特异性CD4+ T淋巴细胞相互作用时可分泌更高水平的外泌体[4]；其他类型的细胞还可以通过钙离子载体或其他刺激分泌外泌体[5]。重庆测序外泌体平台
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