福建技术外泌体全转录测序

人体中几乎所有类型的细胞都能产生外泌体，它普遍存在于组织细胞间隙及体液中。以往认为外泌体属于细胞“垃圾”，且因此低估它的重要作用。虽然外泌体在30多年前被发现，但是直到较近才开始意识到其重要性。外泌体（Exosome）是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构，内部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物质。外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的膜性囊泡。包括tumour细胞在内的几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。1987年Johnstone将其命名为“exosome”。福建技术外泌体全转录测序

转移导致绝大多数的结直肠ai（CRC）相关死亡，但目前对CRC原发灶中转移起始细胞的具体特征和潜在机制知之甚少，而环状RNA（circRNAs）是否参与其中也尚不明确。来自中山大学的谢丹研究团队较新发表在MolecularCancer的研究揭示了名为circLONP2的环状RNA（circRNAs）在CRC进展过程中是关键的转移启动分子。circLONP2通过调控miR-17的细胞内成熟和细胞间转移，导致原发部位的转移启动能力扩散，加速tumour细胞跨器guan转移。circLONP2或可作为CRC医治中的预后预测因子和新的抗转移医治靶点。上海云序生物外泌体平台外泌体鉴定方式：主要有四种方法：透射电子显微镜（TEM）、Nanosight、Western Blot和流式细胞术。

外泌体蛋白有以下几类：外泌体中常见的蛋白质多与其生物发生机制有关，外泌体含有的细胞质蛋白，如膜蛋白和RAB蛋白，可以促进MVBs与细胞膜的融合及外泌体的释放；Tsg-101及附属蛋白质Alix参与ESCRT过程，促进内体膜的凹陷。外泌体含有参与抗原呈递的蛋白质，如CD1、MHCⅠ和MHCⅡ，其在免疫调节中发挥重要作用，MHCⅠ还参与向T细胞呈递抗原的生理过程。外泌体表面还存在热休克蛋白，如HSP70和HSP90，促进了抗原肽与MHCⅠ及MHCⅡ的结合。外泌体含有信号转导蛋白，如G蛋白和蛋白激酶。外泌体含有丰富的蛋白水解酶，这表明外泌体能够促进细胞转移。外泌体中还含有细胞质微管蛋白、肌动蛋白和肌动蛋白结合蛋白。但目前未发现外泌体中含有与内质网、高尔基体和细胞核相关的蛋白质。

外泌体中包含多种miRNA，调控靶细胞生理活性，本文发现脂肪组织巨噬细胞（adiposetissuemacrophages，ATMs）分泌的外泌体中含有miRNA并可以转移到胰岛素的靶细胞中，从而调节靶细胞对胰岛素的敏感性以及体内的总糖代谢稳态。Olefsky团队从肥胖小鼠脂肪组织内分离出巨噬细胞，再收集细胞里的外泌体，用它们处理体型瘦的健康小鼠，发现接受了外源外泌体的小鼠虽然体重依然正常，但却出现肥胖诱导型胰岛素抵抗症状。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分，在神经系统和精神疾病，中医学及其他领域也有不少外泌体相关项目中标。

较近的研究表明，非编码RNA（ncRNAs）可以选择性地包装成外泌体，并从供体细胞传递到受体细胞，从而调节受体细胞的行为。越来越多的证据表明，在转移或非转移的结直肠ai（CRC）患者以及健康对照中，血液中的外泌体ncRNAs表现出不同的表达模式。此外，外泌体ncRNAs可参与调控tumour微环境、建立转移前生态位以及通过细胞-细胞交流诱导耐药。外泌体ncRNA有潜力作为CRC患者诊断、预后预测和医治反应监测的生物标志物。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分。外泌体可促进生物体免疫应答反应。中国台湾研究外泌体分析

过滤离心：这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性，但同样纯度不足。福建技术外泌体全转录测序

纳米颗粒跟zong分析技术（Nanosight Tracking Analysis，NTA）是一种比较新颖的表征纳米颗粒的方法，它可直接并实时观测纳米颗粒。NTA 通过光学显微镜收集纳米颗粒的散射光信号，拍摄一段纳米颗粒在溶液中做布朗运动的影像，对每个颗粒的布朗运动进行追zong和分析，从而计算出纳米颗粒的流体力学半径和浓度。 通过SDS-PAGE电泳分析得到Exosome中蛋白的含量及种类；通过Western-Blot检测Exosome中特定的蛋白表达情况。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分。福建技术外泌体全转录测序

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