辽宁外泌体结果

外泌体（Exosomes）是一种直径在40-100 nm的圆形单层膜结构，是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分，如微小RNA ( microRNA，miRNA)、长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）、mRNA和环状RNA（circular RNA，circRNA）。环状RNA（circular RNA）是近来新发现的一种非编码RNA分子，研究趋势火爆。环状RNA表达具有组织和疾病特异性，与组织发育、疾病发生 和发展密切相关。此外环状RNA不易降解，可做为新型疾病分子标志物。外泌体环状RNA的研究势必会为疾病诊断与医治带来极大帮助。环状RNA（circular RNA）是近来新发现的一种非编码RNA分子，研究趋势火爆。辽宁外泌体结果

外泌体在细胞间通讯中发挥重要作用，可以影响细胞的多种功能，包括细胞因子的产生、细胞增殖、细胞凋亡和代谢等。目前认为，外泌体主要通过以下方式与受体细胞结合：①外泌体将膜蛋白或其内容物转移至受体细胞，被受体细胞膜完全吞噬，这一过程需要非常规脂质LBPA和附属蛋白质Alix；②外泌体膜与受体细胞膜直接融合；③外泌体上的跨膜蛋白直接作用于受体细胞膜表面的信号分子。例如，滤泡树突细胞分泌的外泌体携MHC-跨膜蛋白，其可刺激B淋巴细胞和T淋巴细胞表面的信号分子。外泌体与受体细胞以何种方式结合取决于外泌体的大小及外泌体携带的物质。辽宁外泌体结果环状RNA表达具有组织和疾病特异性，与组织发育、疾病发生和发展密切相关。

MSCs是干细胞家族的重要成员，属于多能干细胞，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。人间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞，还能向受损组织趋化。MSCs通过旁分泌方式释放细胞因子，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器guan损伤修复，是一种有前景的能够用于疾病医治的干细胞来源。

目前，外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。 超速离心：耗时耗力，往往需要8-30个小时；每次较多只能处理6个样品；需要大量的起始材料；产量不高。需一台超速离心机。 将欲提取的细胞培养上清液10ml，在4 ℃的环境下，300×g 10min，2000×g 20min，弃沉淀，去除细胞；然后 l0,000×g 30min ，弃沉淀，去除亚细胞成分；再用10,000×g 60min，弃掉上清液，较后所得沉淀既为exosome ，用30ml PBS 溶液重新悬浮沉淀物，混匀后再以10,000×g 60min，用 l ml PBS溶液悬浮沉淀物提纯的exosome 溶液分别装入eppendorf 管内，置于-80℃冰箱内保存备用。样品运输：样品置于1.5mLEppendorf管中，封口膜封好，干冰运输。

如今外泌体分析用于临床诊断和医治监控显然是一个重要领域。特定的跨膜蛋白信号可以识别tumour特异性的外泌体，而外泌体内蛋白的改变可以用于推断tumour细胞对医治措施的反应。虽然外泌体有如此大的临床价值，但是临床日常外泌体分析却十分困难，这是因为目前缺少足够灵敏且快速的试验平台，尤其是进行外泌体蛋白质分析。 目前人们利用电镜来分析外泌体的大小和形态，利用流式细胞仪来分析细胞表面标记，通过Western blot和ELISA等方法对蛋白进行分析，或通过qPCR和新一代测序NGS来分析RNA。近年来,研究学者相继发现子宫液、输卵管液、胎盘中也存在外泌体。辽宁外泌体结果

外泌体是细胞分泌的大小为40-100nm的盘状囊泡，分布于人体体液。辽宁外泌体结果

1983年，外泌体于绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其命名为“Exosome”。随后的10年，外泌体并未受到足够的重视。 直至1996年，G.Raposo发现类似于B淋巴细胞能分泌抗原提呈外泌体，这种外泌体携带MHC-Ⅱ类分子、共刺激因子和粘附因子。研究表明这种B细胞来源的外泌体可以直接刺激效应CD4+细胞的抗tumour反应。 1998年，L.Zitvogel等发现树突细胞（DC cell）也能产生有抗原提呈能力的外泌体，而且外泌体含有功能性的MHC-Ⅰ类和Ⅱ类分子，还有共刺激因子。这种外泌体启动了特异性的CTL杀伤作用，促进了T细胞依赖的抗tumour效应。辽宁外泌体结果

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